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加味附子理中免煎颗粒对急性马兜铃酸肾病大鼠细胞凋亡的影响
目的:通过研究加味附子理中免煎颗粒对急性马兜铃酸肾病(AAN)大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响探讨其治疗急性AAN的作用机制.方法:将90只SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药组、强的松组、中药+强的松组,其中正常组10只,其余各组均为20只.模型组、中药组、强的松组及中药+强的松组按100 mg·kg-1·d-1剂量予马兜铃酸A纯品连续ig3 d建立AAN模型；从实验第6天开始,中药组予加味附子理中免煎颗粒(按生药量计为3.55 g·kg-1·d-1,10 mL·kg-1 ·d-1)ig,强的松组予强的松(0.5 mg·kg -·d-1 )ig,中药+强的松组予加味附子理中免煎颗粒(3.55 g·kg -·d-1)+强的松(0.5 mg·kg-1·d-1)ig,模型组和正常组则予蒸馏水10 mL·kg-1·d-1ig;连续给药3周后处死各组大鼠.以RT-PCR检测各组大鼠肾组织Bcl-2mRNA,Bax mRNA的表达,免疫组化法及Western blot法检测各组大鼠肾组织Bcl-2,Bax蛋白的表达,原位末端标记法(TUNEL)检测肾小管上皮细胞凋亡.结果:模型组大鼠肾组织Bcl-2 mRNA和蛋白表达明显减少,而Bax mRNA和蛋白表达增多；与模型组比较,中药组、强的松组和中药+强的松组均能不同程度增加Bcl-2 mRNA和蛋白的表达,降低Bax mRNA和蛋白的表达,差异均有统计学意义(P＜0.05)；其中以中药+强的松组的作用佳(P＜0.05).TUNEL结果显示,正常组大鼠肾小管可见少量凋亡细胞,模型组则有大量凋亡的肾小管上皮细胞,差异有统计学意义(P＜0.05)；与模型组相比,中药组、强的松组和中药+强的松组凋亡细胞数均减少(P＜0.05)；而中药+强的松组凋亡细胞数减少为明显(P＜0.05).结论:肾小管上皮细胞凋亡参与了急性马兜铃酸肾病的发病,加味附子理中免煎颗粒能减轻急性马兜铃酸肾病大鼠肾小管上皮细胞的凋亡,但联合强的松治疗疗效更佳.
关键词： 加味附子理中免煎颗粒 急性马兜铃酸肾病 细胞凋亡 Bcl-2:Bax -
发酵虫草菌粉和泼尼松对急性马兜铃酸肾病大鼠肾小管Notch2/hes-1信号通路活化的影响
目的 探讨发酵虫草菌粉及泼尼松对急性马兜铃酸肾病(acute aristolochic acid nephropathy,AAAN)大鼠肾小管上皮细胞Notch2/hes-1信号通路的影响.方法 将50只SD大鼠随机分为正常组、模型组、发酵虫草菌粉组(CS组)、泼尼松组及CS加泼尼松组,每组10只.以马兜铃酸A纯品100 mg/(kg·d)连续灌胃3天建立AAAN模型.CS组予发酵虫草菌粉5.0 g/(kg·d)灌胃,泼尼松组予泼尼松0.5 mg/(kg·d)灌胃,CS加泼尼松组予两药联合灌胃,连续3周.检测各组大鼠肾功能[尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)],HE染色观察肾脏病理改变,TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡,免疫组织化学法及Western blot法检测大鼠肾组织Notch2、Hes-1蛋白表达.结果 HE染色结果显示,正常组大鼠肾组织结构正常;模型组大鼠出现肾小管坏死改变;泼尼松组、CS组及CS加泼尼松组肾小管病理明显改善.与正常组比较,模型组大鼠BUN和SCr水平、肾小管间质半定量评分、凋亡细胞比例以及Notch2、Hes-1蛋白表达均显著升高(P <0.01).与模型组比较,CS组、泼尼松组及CS加泼尼松组上述指标均显著降低(P <0.01).以CS加泼尼松组降低更明显(P <0.05,P <0.01).结论 Notch2/hes-1信号通路活化可能参与AAAN肾小管上皮细胞凋亡的发生.CS及泼尼松对AAAN有肾保护作用,但联合干预疗效更佳,其机制可能与抑制肾组织Notch2/hes-1信号通路活化有关.
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朱砂莲中毒致急性马兜铃酸肾病
1名73岁女性患者,因胃部不适服用朱砂莲粉末约20 g,10 min后出现持续呕吐,经对症治疗未缓解.3 d后出现少尿,尿常规显示:pH 9.0,Glu(+),PRO(++),KET(+).BUN 17.8 mmol/L,SCr 708 μmol/L,UA 294.5 μmol/L.B超显示双肾弥漫性实质病变.诊断为朱砂莲中毒所致的急性马兜铃酸肾病、急性肾衰竭.给予金水宝胶囊、多巴胺、呋塞米、碳酸氢钠、氢化可的松等治疗及血液透析,患者尿量逐渐增多,肾功能改善,症状消失.3个月后随访,肾功能稳定.
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加味附子理中免煎颗粒治疗急性马兜铃酸肾病机理的研究
目的 探讨加味附子理中免煎颗粒治疗急性马兜铃酸肾病的作用机制.方法 将90只SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药组、泼尼松组、中药+泼尼松组,其中正常组10只,其余各组均为20只.模型组、中药组、泼尼松组及中药+泼尼松组按100mg/kg·d剂量予马兜铃酸A纯品连续灌胃3d建立急性马兜铃酸肾病模型；从实验第6天开始,中药组予加味附子理中免煎颗粒(10 ml/kg·d)灌胃,泼尼松组予泼尼松(0.5 mg,/kg·d)灌胃,中药+泼尼松组予加味附子理中免煎颗粒(10ml/kg·d)+泼尼松(0.5 mg/kg·d)灌胃,模型组和正常组则予蒸馏水10 ml/kg·d灌胃；连续给药3周后处死各组大鼠.以免疫组化法检测各组大鼠肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),以RT-PCR检测各组大鼠肾组织Bcl-2 mRNA、Bax mRNA的表达,Western blot(蛋白印迹法)法检测细胞色素C的表达,原位末端标记法(TUNEL)检测肾小管上皮细胞凋亡.结果 模型组大鼠肾组织SOD表达明显减少,而MDA水平增高,Bcl-2mRNA表达明显减少,而Bax mRNA表达增多,细胞色素C显著增多,可见大量凋亡的肾小管上皮细胞(P＜0.01).中药组、泼尼松组和中药+泼尼松组均能不同程度增加SOD的表达,降低MDA的水平,提高Bcl-2 mRNA的表达,降低BaxmRNA的表达；减少细胞色素C的释放并减少肾小管上皮细胞的凋亡,与模型组比较(P ＜0.05或P＜0.01).作用强度由大到小依次为中药+泼尼松、泼尼松、中药(P ＜0.05或P＜0.01).结论 肾小管上皮细胞凋亡参与了急性马兜铃酸肾病的发病,加味附子理中免煎颗粒可以从线粒体途径抑制肾小管上皮细胞的凋亡达到治疗作用,但联合泼尼松治疗疗效更佳.
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加味附子理中汤对急性马兜铃酸肾病大鼠肾功能及临床表现影响的研究
目的 观察加味附子理中汤对关木通所致急性马兜铃酸肾病大鼠肾功能及临床表现的影响.方法 将SD雌性大鼠80只随机分为正常组(n=20)、模型组(n=20)、对照组(n=20)、中药组(n=20),除正常组外,其余3组均予以关木通煎剂[60g/(kg·d)]灌胃造急性马兜铃酸肾病大鼠模型,模型组予以生理盐水灌胃,对照组予以泼尼松[0.5mg/(kg·d)],中药组予以加味附子理中汤,共治疗3周,观察各组大鼠肾功能(血肌酐、尿素氮)及临床症状积分的变化.结果 造模后大鼠均出现了脾阳虚症状;与正常组比较,模型组、中药组和对照组血肌酐、尿素氮均显著增高,差异有统计学意义(P<0.01),表明造模成功;与模型组比较,中药组和对照组血肌酐、尿素氮及临床症状积分均下降明显,差异有统计学意义(P<0.01);与对照组相比较,中药组血肌酐、尿素氮、临床症状积分下降更明显,差异有统计学意义(P<0.05).结论 关木通所致急性马兜铃酸肾病大鼠模型临床表现以脾阳虚为主;加味附子理中汤能改善急性马兜铃酸肾病大鼠的肾功能和临床表现,提示对急性马兜铃酸肾病有良好治疗作用.
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温阳健脾法对急性马兜铃酸肾病大鼠肾功能影响的研究
目的:观察温阳健脾法对急性马兜铃酸肾病大鼠肾功能及临床表现的影响.方法:采用关木通水煎剂灌胃复制急性马兜铃酸肾病大鼠模型,试验前后观察正常组、模型组、对照组、中药组大鼠血肌酐、尿素氮及临床症状积分的变化.结果:造模后大鼠均出现脾阳虚症状;造模组与正常组比较血肌酐、尿素氮均显著增高(P＜0.01),表明造模成功;中药组和对照组与模型组比较血肌酐、尿素氮及临床症状积分均明显下降(P＜0.01);中药组与对照组比较下降更明显(P＜0.05).结论:关木通所致急性马兜铃酸肾病大鼠临床表现以脾阳虚为主,温阳健脾法能改善急性马兜铃酸肾病大鼠的肾功能和临床表现,提示对急性马兜铃酸肾病大鼠有良好的治疗作用.
