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钩吻总碱对人结肠癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制
目的:探讨钩吻总生物碱提取物(钩吻总碱)促进人结肠癌HT-29细胞凋亡的机制.方法:钩吻总碱体外干预HT-29细胞24 h后,用噻唑蓝(MTT)比色法评估其对细胞增殖的影响,4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色法及流式细胞术(AnnexinV-FITC/PI)观察HT-29细胞的凋亡情况,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察HT-29细胞B型淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax),Bcl-2 mRNA表达情况,利用紫外分光光度法检测含半胱氨酸的天冬氨酸水解酶-3(Caspase-3)表达量的变化.结果:钩吻总碱可抑制HT-29细胞增殖,200 mg·L-1钩吻总碱干预24 h后,对HT-29细胞增殖的平均抑制率达54.17%.DAPI染色及流式细胞术(Annexin V-FITC/PI)观察到钩吻总碱可促进HT-29细胞凋亡.RT-PCR观察到钩吻总碱能降低HT-29细胞Bcl-2 mRNA表达(P<0.05),对Bax mRNA表达无明显影响,提高了Bax/Bcl-2 mRNA表达(P<0.05).利用紫外分光光度法检测到随着钩吻总碱浓度的升高,HT-29细胞的Caspase-3表达呈上升趋势(P<0.05).结论:钩吻总碱能有效地抑制HT-29细胞的增殖,促进HT-29细胞的凋亡,其机制可能与通过Bax/Bcl-2途径诱导细胞凋亡相关.