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清燥救肺汤对Lewis肺癌小鼠EGFR,NF-κB,ICAM-1表达及JAK1,STAT1蛋白磷酸化的影响
目的:观察清燥救肺汤对荷Lewis小鼠肺癌瘤重、瘤指数、检测核转录因子-κB(NF-κB),细胞间黏附分子-1(ICAM-1),两面神激酶1(JAK1),表皮生长因子(EGFR)表达及信号传导及转录激活因子1(STAT1)蛋白磷酸化的影响.方法:雄性C57BL/6J小鼠50只,随机分为模型组,化疗[50 mg·kg-1·(2 d)-1]组,清燥救肺汤高、中、低剂量(15.2,7.6,3.8g·kg-1 ·d-1)组,每组10只.右腋下注射细胞建立荷Lewis肺癌小鼠模型,清燥救肺汤组以相应剂量造模前2周开始灌胃给药,环磷酰胺(CTX)组以CTX相应剂量腹腔注射给药,隔日1次,模型组以等体积生理盐水灌胃给药,2周后处死各组小鼠并取瘤组织,称定质量计算瘤指数,免疫组化法检测NF-κB蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测ICAM-1 mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测EGFR,pJAK1及pSTAT1蛋白表达.结果:与模型组比较,清燥救肺汤高、中剂量组及CTX组瘤重、瘤指数显著降低(P＜0.01),清燥救肺汤高、中剂量组及CTX组NF-κB蛋白表达,EGFR蛋白表达明显降低(P ＜0.05,P＜0.01),清燥救肺汤高、中剂量组ICAM-1 mRNA,pJAK1蛋白表达明显降低(P＜0.05,P＜0.01),清燥救肺汤高、中、低剂量组pSTAT1蛋白磷酸化显著降低(P＜0.01),高、中剂量组效果优于CTX组(P＜0.01).结论:清燥救肺汤能显著抑制荷Lewis小鼠肺癌细胞增殖,其机制可能与降低NF-κB,ICAM-1,pJAK1,EGFR表达及抑制STAT1蛋白磷酸化有关.
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信号传导及转录激活因子1基因沉默促进人牙周膜细胞成骨细胞分化
目的：探讨信号传导及转录激活因子1（ signal transducers and activators of transcription 1，STAT1）对人牙周膜细胞骨向分化的作用及其机制。方法采用酶消化法分离培养原代人牙周膜细胞，细菌脂多糖（ Lipopolysaccharide，LPS）刺激人牙周膜细胞，采用成骨分化培养基诱导人牙周膜细胞骨向分化。通过转染 STAT1过表达载体或小干扰 RNA （ small interfering RNA，siRNA）实现STAT1基因过表达或基因表达沉默。采用碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）活性检测试剂盒和茜素红染色检测成骨分化。实时定量PCR方法检测STAT1，Ⅰ型胶原蛋白（ collagen type Ⅰα1，ColA1）和骨调素（ osteopontin，OPN）的mRNA表达水平。 Western blot方法检测STAT1和Runt相关转录因子2（ runt?related transcription factor 2，Runx2）的蛋白表达水平。结果 LPS炎性刺激诱导人牙周膜细胞STAT1高表达。 STAT1过表达显著抑制ALP活性、骨质矿化、Runx2的核转移以及ColA1和OPN的表达水平。相反，STAT1基因沉默则显著促进ALP 活性、骨质矿化、Runx2的核转移以及ColA1和OPN的表达水平。结论 STAT1基因沉默促进人牙周膜细胞成骨分化，其机制与促进Runx2核转移有关。
关键词： 信号传导及转录激活因子1 人牙周膜细胞 成骨细胞分化 -
清燥救肺汤对结肠癌小鼠凋亡相关蛋白表达的影响
[目的]观察清燥救肺汤对CT26结肠癌细胞增殖及凋亡相关蛋白如增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达,细胞外调节蛋白激酶(ERK)、Janus激酶1(JAK1)、信号传导及转录激活因子1(STAT1)磷酸化蛋白表达的影响.[方法]50只雄性BALB/c小鼠,随机分为模型组,化疗组,清燥救肺汤高、中、低剂量组,每组10只.经小鼠右腋下注射CT26细胞以建立结肠癌模型.清燥救肺汤治疗组于造模前2周即开始以15.2、7.6、3.8 g·kg-1·d-1剂量的清燥救肺汤灌胃给药,化疗组在造模完成后以5-氟尿嘧啶(5-FU)25 mg· kg-1剂量腹腔注射给药(隔日1次),模型组以等体积生理盐水灌胃给药.2周后,处死各组小鼠,取瘤组织,称瘤体质量并计算抑瘤率,Western blot法检测p-ERK、PCNA蛋白表达,免疫组织化学法检测p-JAK1、p-STAT1蛋白表达.[结果]清燥救肺汤高、中剂量纽瘤体质量,p-ERK、p-JAK1蛋白表达显著降低,p-STAT1蛋白表达显著升高,与模型组比较,差异均有统计学意义(P＜ 0.05或P＜0.01);清燥救肺汤高、中、低剂量组PCNA蛋白表达明显降低,与模型组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).[结论]清燥救肺汤能显著抑制荷CT26小鼠结肠癌细胞增殖,其机理可能与降低p-ERK、PCNA、p-JAK1及升高p-STAT1蛋白表达有关.
