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HPLC同时测定雪菊中4种黄酮类成分
目的:建立雪菊中4种主要黄酮类成分的同时含量测定方法.方法:采用Cosmosil-5C18-AR-Ⅱ色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%乙酸溶液梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,检测波长280 nm(黄诺玛苷、异奥卡宁)和378nm(马里苷、奥卡宁),测定雪菊中黄诺玛苷、异奥卡宁、马里苷、奥卡宁的含量.结果:4种黄酮类成分色谱分离良好,黄诺玛苷、异奥卡宁、马里苷、奥卡宁线性范围分别为0.503 5~5.035 μμ,g,0.502 5~5.025 μg,0.505 5~5.055 μg,0.506 5 ~5.065μg,r值均>0.999,加样回收率在95.4%~98.4%.结论:该测定方法快速、准确,可为雪菊的质量控制方法提供参考.
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奥卡宁的提取分离及抗血小板聚集作用研究
目的 分离和纯化两色金鸡菊中的奥卡宁,并研究其抗血小板聚集作用.方法 两色金鸡菊干燥花序经乙醇回流提取得到两色金鸡菊醇提物(Ethanol Extract,ETE),用乙酸乙酯和正己烷对ETE水溶液进行萃取,采用硅胶中压柱层析方法对萃取物进行分离得到奥卡宁;采集静脉血,随机分为空白组(生理盐水)、ETE高、中、低(900、300、100 μg/mL)剂量组、奥卡宁组高、中、低(45、15、5 μg/mL)剂量组、阿司匹林(acetylsalicylic acidsigma,ASA)组(500μg/mL),建立二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)、凝血酶诱导的血小板聚集模型,采用Born比浊法,以血小板聚集抑制率为指标,观察其抗血小板聚集作用.结果 从两色金鸡菊中分离得到奥卡宁.与空白组比较,ETE中、高剂量组和奥卡宁高剂量组可以抑制ADP诱导的血小板聚集,差异有统计学意义(P<0.01).与空白组比较,ETE中剂量组和奥卡宁中剂量组可以抑制凝血酶诱导的血小板聚集,差异有统计学意义(P<0.05),ETE高剂量组和奥卡宁高剂量组可以抑制凝血酶诱导的血小板聚集(P<0.01).结论 两色金鸡菊中的奥卡宁是抗血小板聚集的主要活性物质.