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  • 大萼香茶菜甲素对急性早幼粒细胞性白血病细胞体外作用的影响

    作者:夏骏;周永列;王珍妮;吕亚萍;吴建国;邱莲女;石浩

    目的:观察大萼香茶菜甲素(Maeroealyxin A,MA)体外对急性早幼粒细胞性白血病(NB4细胞)增殖抑制、诱导凋亡及诱导分化的作用,并探讨其作用机制.方法:将不同浓度MA在体外与NB4细胞共同培养,采用细胞计数、MTT细胞活性检测体外观察MA对NB4细胞增殖抑制作用;采用细胞形态观察、Hoechst33258荧光染色、DNA亚二倍体检测和Annexin V/PI双染色方法研究MA诱导NB4细胞凋亡作用;采用细胞形态学观察、NBT试验、细胞免疫表型CD11b检测等方法研究MA诱导NB4细胞分化作用;采用流式细胞技术分析凋亡调控基因Bcl-2、bax、bad、Fas、p53表达情况和线粒体膜蛋白、线粒体跨膜电位(△ψm)的改变探讨MA体外诱导NB4细胞凋亡和分化机制.实验设置空白对照和全反式维甲酸(ATRA)阳性对照.结果:不同浓度MA在体外对NB4细胞增殖有明显抑制作用,呈现剂量和时间的量效关系;较低浓度MA作用48h后可以诱导NB4细胞分化,较高浓度MA则显著地促进细胞凋亡;在凋亡调控基因中,Bel-2、Fas表达无明显改变,bax、bad、Bcl-2/bax、p53随着药物作用浓度的增高表达逐渐增高;线粒体膜蛋白Apo2.7随着药物作用浓度和作用时间的增加表达逐渐增高,线粒体膜电位则逐渐下降.结论:MA在体外能明显抑制NB4细胞增殖,诱导细胞分化;一定浓度药物能够通过bax、bad等凋亡调控基因作用于线粒体诱导细胞凋亡.

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