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康欣口服液对老年小鼠肝线粒体DNA缺失的影响
目前认为线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)缺失突变随增龄积累是导致衰老的重要因素之一.哺乳动物的mtDNA是一种双链环状分子,大约由16.5kb左右的碱基对组成,包含37种基因,分别编码12s和16srRNA,22种tRNA及13种氧化磷酸化的酶复合体亚基.由于mtDNA裸露于产生高氧自由基的线粒体内膜下,损伤修复系统有限,故易受氧自由基的侵袭而被氧化损伤,从而产生缺失突变.康欣口服液是补肾健脾养血活血法延缓衰老的代表方,大量的研究表明该方具有改善衰老症状积分,抗自由基损害,免疫调节,调节脂代谢,改善内分泌水平,调节神经生理学功能等延缓衰老的作用[1,2].本研究采用聚合酶链技术,观察康欣口服液对老年小鼠肝线粒体DNA缺失的影响,以期从分子水平探讨康欣口服液延缓衰老的机理.
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康欣口服液对老年小鼠脑线粒体DNA缺失突变影响的实验研究
目的:研究康欣口服液对Balb/c小鼠脑线粒体DNA(mtDNA)缺失突变的影响.方法:近交系Balb/c小鼠,分为青年组(6周),中年组(6个月),老年组(14个月)各10只,提取小鼠脑组织的mtDNA,采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增缺失型的mtDNA片段,以证实老年组小鼠脑组织中存在mtDNA缺失.近交系Balb/c老年小鼠分别灌胃给予生理盐水(老年空白对照组),康欣口服液(老年康欣口服液组),连续四个月后处死,提取脑组织的mtDNA,PCR技术分别扩增野生型和缺失型的mtDNA片段,运用凝胶成像仪进行光密度扫描,比较两组缺失型mtDNA/野生型mtDNA的光密度比值.结果:近交系老年Balb/c小鼠脑mtDNA中存在明显的片段缺失,而在中年组与青年组中未检测到相同片段的缺失.与老年空白对照组相比,康欣口服液能显著降低老年Balb/c小鼠mtDNA的缺失率(P<0.001).结论:mtDNA的缺失突变随年龄而积累,康欣口服液可以抑制老年小鼠脑mtDNA的缺失.
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康欣口服液对老年小鼠肾线粒体DNA缺失突变的影响
目的研究康欣口服液对老年Balb/c小鼠肾线粒体DNA(mtDNA)缺失突变的影响.方法老年Balb/c小鼠随机分为空白组和康欣口服液组,分别给予生理盐水和康欣口服液4个月.采用聚合酶链反应(PCR)技术和光密度扫描检测两组mtDNA的缺失突变情况.结果与空白对照组比较,康欣口服液能显著减少老年Balb/c小鼠肾mtDNA的缺失(P＜0.001).结论康欣口服液可以抑制老年小鼠mtDNA的缺失突变,对mtDNA有保护作用.
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康欣口服液抗脑衰老的实验研究
目的 观察康欣口服液对衰老大鼠行为学以及脑组织生物化学的影响,研究该复方抗脑衰老的作用机制.方法 用12.5 mg/ml D-半乳糖给大鼠颈背部皮下注射连续40d,形成亚急性衰老模型,运用水迷宫观察行为学变化,检测脑组织NOS、NO、GSH-Px、MAO-B的变化.结果 水迷宫实验表明康欣口服液组与模型对照组相比有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01).NO、GSH-Px显著升高(P＜0.05),NOS、MAO-B显著降低(P＜0.05).结论 康欣口服液可以提高衰老大鼠学习记忆能力,抑制大鼠脑NOS、MAO-B活性,提高GSH-Px活性,增加NO含量,从而延缓脑衰老.
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康欣口服液质量标准的改进
目的 建立改进康欣口服液标准的方法.方法 采用薄层色谱(TLC)法对康欣口服液中的丹参、地骨皮进行定性鉴别;采用高效液相色谱(HPLC)法测定淫羊藿苷的含量.结果 定性鉴别方法专属性强.在5.36～26.8 μg范围内淫羊藿苷峰面积与浓度线性关系良好,r=0.999 8;样品平均加样回收率为100.4%(n=9),RSD为1.84%.结论 该法简便、快速、结果准确,可有效控制康欣口服液的质量.
