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一种鉴别与大肠埃希菌O157血清凝集的弗氏枸橼酸杆菌的PCR方法
目的 利用基于O抗原翻转酶wzx基因的PCR方法,鉴别与大肠埃希菌O157血清凝集的弗氏枸橼酸杆菌和O157大肠埃希菌.方法 用微生物鉴定仪对细菌进行生化鉴定,与P157血清凝集,同时扩增wzx基因.结果 25株与大肠埃希菌O157血清凝集的弗氏枸橼酸杆菌及1株不与大肠埃希菌O157血清凝集的弗氏枸橼酸杆菌wzx基因扩增为阳性,8株与O157血清不凝集的弗氏枸橼酸杆菌wzx基因扩增为阴性,20株O157:H7大肠埃希菌wzx基因扩增为阴性.结论 对于可与O157血清发生强凝集的弗氏枸橼酸杆菌,基于O抗原翻转酶wzx基因的PCR方法是一种有效的快速鉴别方法.
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2份疑似O157大肠埃希菌感染腹泻粪便的病原学检测
[目的]了解肠道中与O157大肠埃希菌有共同抗原的部分菌株特性,为防止误诊提供参考.[方法]对胶体金免疫层析法阳性的腹泻病人粪便接种mEC肉汤增菌,用免疫磁珠浓缩目标菌株,划线CHROMagar O157显色琼脂平板,纯化后进行血清学诊断,再集中进行系统生化鉴定和毒力检测等.[结果]2份腹泻粪便中检出与O157大肠埃希菌有共同抗原的菌株,分别为普通大肠埃希菌和弗劳地枸橼酸杆菌,其中前者的毒力基因SLT1、SLT2、eaeA和hly4检测均阴性.[结论]与O157大肠埃希菌存在共同抗原的菌株比较普遍,胶体金免疫层析法做为快速诊断只是诊断中一个的提示,临床诊断必须辅以流行病学、临床症状和实验室生化结果加以综合判断.
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山东省首次检出O157大肠埃希菌志贺毒素Ⅱ变种
目的:了解山东省E.coli O157大肠埃希菌携带Stx2及Stx2vha情况.方法:采用从山东省5个监测点腹泻病人和家禽、家畜等粪便标本中分离的O157大肠埃希菌,用PCR方法检测特异性志贺毒素2及其变种毒素;提取菌株的染色体DNA进行限制性内切酶PstI消化,使用slt2探针进行Southern杂交检测菌株毒素的变化情况.结果:从腹泻病人、家禽家畜等粪便标本分离的O157大肠埃希菌PCR检测STL2(c,d)阳性的 9株,用slt2探针杂交方法检测有4株为Stx2vha阳性,其中1株杂交带型不同于其他菌株,是否为新的毒素变种需进一步研究.结论:山东省从腹泻病人和外环境分离的O157大肠埃希菌存在志贺毒素Ⅱ变种.
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南宁市O157大肠埃希菌的监测研究
目的 探讨南宁市肠出血性O157大肠埃希氏菌人感染、动物和媒介昆虫带菌状况.方法 2008年所采集的腹泻病人粪便、动物粪便和苍蝇等标本,经处理后接种mEC肉汤增菌,先用免疫胶体金标法做初筛,阳性标本用免疫磁珠浓缩目标菌,划线接种CHROMagarO157显色琼脂平板,纯化后进行血清学诊断,然后集中进行系统生化鉴定和毒力检测等.结果 共检测1 083份标本,检出10株0157大肠埃希菌,总阳性率为0.92%,其中猪粪便为9.38%,牛粪为4.00%,苍蝇为4.35%,鸡粪为0.49%,腹泻病人粪便和鸭粪均未能出O157大肠埃希菌,部分标本中检出与O157大肠埃希菌有相关抗原的致病性大肠埃希菌(EPEC)和未能定型的大肠埃希氏菌;对所检出10株O157菌做SLT1、SLT2、eaeA、hly44种毒力基因的检测,发现3株菌(同一猪场的1份猪粪便和2份苍蝇中检出)eaeA+hly44阳性,未见含有SLT1 SLT2基因,其他菌株SLT1SLT2 eaeA hly44均为阴性.结论 南宁市养殖场部分动物体携带有一定程度致病力的O157大肠埃希菌,并已造成了周围环境污染,威胁人们的生命健康,提示加强宿主动物O157大肠埃希菌监测和研究是防止未来大流行的关键.
