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HepG2.2.15细胞对同时包载丁香苦苷和羟基酪醇纳米粒的摄取机制研究
目的 考察HepG2.2.15细胞对同时包载丁香苦苷和羟基酪醇纳米粒(nanoparticles co-loaded with syringopicroside and hydroxytyrosol,SH-NPs)的摄取机制.方法 采用沉淀法制备SH-NPs,以异硫氰酸荧光素为荧光标记物,采用流式细胞仪研究HepG2.2.15细胞对SH-NPs的摄取机制.结果 秋水仙素为抑制剂,孵育时间在0.5~24 h范围内,阳性细胞百分数由1.9%增加到56.4%;药物浓度为125、250、500 μg/mL时,阳性细胞百分数分别为4.9%、3.4%、3.9%.氯喹为抑制剂,孵育时间在0.5~24 h范围内,阳性细胞百分数由7.4%增加到55.4%;药物浓度为125、250、500 μg/mL时,阳性细胞百分数分别为19.5%、22.5%、27.6%.结论 秋水仙素与氯喹对HepG2.2.15细胞摄取有抑制作用,且HepG2.2.15细胞对SH-NPs的摄取与药物浓度、孵育时间呈正相关,推断HepG2.2.15细胞对SH-NPs细胞的摄取机制为非特异性吸附内吞.
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细胞穿透肽在生物医学领域中的应用
细胞膜作为活细胞选择性渗透屏障是细胞存活和功能的必要组成部分.然而,在许多情况下,外源性活性物质通过胞浆膜的有效传递存在物质运输至胞内的主要屏障.在过去20年里,多肽转运药物至细胞的潜能被许多细胞穿透肽的发现而重视.细胞穿透肽作为载体可以有效转运如小干扰RNA、核酸、蛋白质、小分子治疗物质、荧光量子点和磁共振成像造影剂等物质.本文主要介绍了细胞穿透肽的分类和细胞摄取机制,及其作为新型载体在细胞成像、核定位、pH-敏感和热靶向传递系统发展中的应用前景.
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纳米粒摄取机制的研究进展
随着纳米技术的发展,纳米材料在药物传输领域有着潜在的应用空间.研究细胞对纳米粒的细胞摄取机制,有助于从细胞层次上理解生命体的生理过程和药物的作用机制,掌握细胞治疗的机理;同时也可为构建更加安全有效的纳米药物载体提供依据.综述了纳米粒摄取机制的新研究进展,在简要介绍纳米粒内吞途径的基础上着重讨论了影响内吞的因素,同时详细介绍了纳米粒内吞途径的常用研究方法.
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胆固醇基修饰的普鲁兰纳米粒的摄取机制及亚细胞分布研究
目的 研究胆固醇基修饰的普鲁兰(CHSP)纳米粒的体外HepG2细胞的摄取机制及亚细胞分布.方法 采用异硫氰酸荧光素(FTTC)标记CHSP,透析法制备FITC标记的CHSP(FITC-CHSP)自组装纳米粒并进行表征.采用MTT法考察CHSP纳米粒对HepG2细胞的毒性.选用选择性的内吞途径抑制剂氯丙嗪、菲律宾菌素和阿米洛利来研究HepG2细胞摄取CHSP纳米粒的机制.后,采用细胞免疫荧光法对内质网、高尔基体和溶酶体进行染色,使用激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)观察不同的孵育时间CHSP纳米粒的亚细胞分布.结果 成功合成了FITC-CHSP,且FITC-CHSP能在水介质中自组装成纳米粒,该纳米粒呈规则球形,平均粒径为(63.0 ±1.9) nm.MTT结果表明CHSP纳米粒对HepG2细胞无明显的细胞毒性.内吞抑制实验表明网格蛋白介导的内吞途径以及巨胞饮途径共同参与了CHSP纳米粒的入胞过程.纳米粒的亚细胞分布实验表明:在研究的孵育时间(4 h)内,并未发现CHSP纳米粒进入高尔基体和内质网;当纳米粒与HepG2细胞孵育30 min时,没有纳米粒定位于溶酶体中,随着孵育时间的延长,大量纳米粒分布于溶酶体中.结论 CHSP纳米粒有望成为细胞内递送治疗剂的一种通用载体.
关键词： 胆固醇基修饰的普鲁兰 纳米粒 异硫氰酸荧光素 摄取机制 亚细胞分布 -
介孔硅脂质囊纳米粒的研制及其细胞摄取机制研究
采用改良Stober法一步合成氨基修饰的阳离子型介孔硅纳米粒(CMSN),结合薄膜水化法和高速离心法制备介年硅脂质囊纳米粒(LP-CMSN).所得LP-CMSN呈圆整球形、粒径分布均一、无团聚、具有明显的核-壳结构,粒径为(114.5±3.7) nm,ζ电位为(9.3±2.5) mV,多分散系数(PDI)为0.17±0.05.细胞水平上,LP-CMSN在0～100 μg/ml范围内对Hela和A549细胞均无明显细胞毒性.以LP-CMSN为载体,选择多柔比星为模型药,采用饱和溶液吸附法制得了载药量为(15.58±3.25)％的载药纳米粒,有效改善了CMSN中药物易突释缺点.选择异硫氰酸荧光素(FITC)为荧光探针,合成了标记率为0.52％的荧光纳米粒.通过流式细胞仪和激光共聚焦显微镜考察LP-CMSN在Hela细胞的摄取机制和入胞途径.结果显示,CMSN通过网格蛋白介导的内吞途径摄取进入细胞,而LP-CMSN主要经过膜融合途径进入细胞,终经溶酶体逃逸后释放药物发挥药效.因此,LP-CMSN具有良好的生物相容性和缓控释特性,并能通过无损害的膜融合途径摄取进入细胞,有望成为新型纳米递药载体.
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纳米颗粒的细胞摄取机制及其影响因素的研究
由于纳米材料具有独特的性能优势，近年来纳米颗粒在临床诊断、药物载体、基因转染、组织工程、细胞示踪等方面被广泛地应用。研究纳米颗粒穿透细胞膜进入细胞内的过程以及相关的摄取机制，将有助于了解纳米材料对机体和器官的影响和作用机理，评价其对生物体潜在的危害性，这为纳米材料更安全有效地应用于生物医学领域提供了重要依据。本文将对细胞摄取纳米颗粒有关方面的近期研究作一综述。
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细胞穿膜肽在给药系统中的应用
细胞穿膜肽是一类能穿过细胞膜并由40个以内氨基酸组成的短肽,根据其来源可以分为天然细胞穿膜肽和人工合成穿膜肽.细胞对穿膜肽的摄取机制尚未统一定论,主要分为直接穿膜传导模式和内吞模式.由于细胞穿膜肽能携带各种物质穿过膜屏障,已被用于各种给药系统研究中,以促进药物的肠吸收、皮肤渗透和跨血脑屏障等.文章主要对细胞穿膜肽的分类、结构特点、穿膜机制和应用进行综述.
