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牵牛子酒提取物对Lewis肺癌的抗肿瘤和抗转移机制研究
目的:观察牵牛子酒提取物对Lewis肺癌生长和转移的影响,研究其抗肿瘤机制.方法:体外采用MTT法和划痕实验检测牵牛子酒提取物对Lewis肺癌细胞生长和迁移的影响,吖啶橙染色检测细胞自噬,荧光黄传输检测细胞间连接通讯,Western blotting检测细胞中水通道蛋白1(AQP1)的表达.体内建立小鼠Lewis肺癌皮下移植模型和实验性肺转移模型评价牵牛子酒提取物的抗肿瘤和抗转移作用,电化学发光法检测荷瘤小鼠血清癌胚抗原(CEA)和β2微球蛋白(β2-MG),免疫组化法检测肺转移小鼠肺脏AQP1和缝隙连接蛋白Cx43表达.结果:牵牛子酒提取物对体外培养的Lewis肺癌细胞呈剂量依赖性生长抑制,明显阻止细胞迁移,降低细胞AQP1蛋白,促进细胞间连接通讯,减少癌细胞无血清自噬.体内实验,与未治疗的模型小鼠比较,牵牛子酒提取物呈剂量依赖性减缓肿瘤生长、阻止肿瘤转移、延长荷瘤小鼠存活时间,同时,牵牛子酒提取物也降低荷瘤小鼠血清CEA和β2-MG水平,能增强荷瘤肺组织间隙连接蛋白Cx43的免疫组化染色深度,减弱水通道蛋白AQP1的阳性染色密度.结论:牵牛子酒提取物能够阻止Lewis肺癌生长和转移,其机制可能与增强细胞间连接通讯和下调细胞水通道AQP1有关.
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转基因鼠C6细胞内在缝隙连接通讯功能测定及其化学调控
目的 研究C6细胞转染单纯疤疹胸苷激酶基因(herpes simplex virus-thymidine kinase,HSV-TK)前后缝隙连接通讯(CJIC)功能及其化学调节变化.方法 用划痕标记染料示踪技术检测不同组别(C6组,C6-TK组,C6-TK+)C6细胞的GJIC功能以及加用缝隙连接蛋白上调剂apigenln后的功能变化.结果 用药前C6组,C6-TK+组及C6-TK+组荧光自伤沿列细胞传递未超过邻近的1列细胞内;用药后3组细胞在荧光显微镜下均可见划痕后的荧光染料可传递至比邻3～4列细胞.结论 C6细胞间通讯微弱,基因转染对其无明显影响;Aplgenin则可显著增强C6细胞间连接通讯从而提高其GJIC功能及"旁观者效应".
