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昆明山海棠提取物对异基因骨髓移植小鼠调节性T细胞的影响
目的 研究昆明山海棠(THH)提取物减轻异基因骨髓移植小鼠移植物抗宿主病(GVHD)作用及可能机制.方法 BALB/c受鼠(H-2~d)清髓性预处理后输注C57BL/6供鼠(H-2~b)骨髓细胞和脾细胞混合液,随机分4组:对照组、环孢素A(CsA)组、THH组、THH+CsA联药组(联药组).观察移植后受鼠GVHD发生情况和嵌合体植入情况,流式细胞术测定受鼠外周血CD_4~+CD_(25)~+T细胞百分率以及实时荧光定量PCR方法检测受鼠脾细胞内Foxp3 mRNA表达水平.结果 (1)10天时CsA组、THH组、联药组CD_4~+CD_(25)~+T细胞数量开始增加,15天达高峰,之后开始下降,30天时联药组仍维持较高水平;(2)CsA组、THH组、联药组受鼠脾细胞内Foxp3 mRNA表达水平在15天达高峰,联药组高,之后逐渐下降,联药组下降缓慢,30天时仍维持较高水平;(3)CsA组、THH组、联药组受鼠生存时间均长于对照组(P<0.05);(4)CsA组、THH组、联药组GVHD临床表现和病理改变均比对照组轻;(5)对照组、CsA组、THH组、联药组受鼠骨髓细胞表面H-2n百分率均>95%.结论 THH可减轻异基因骨髓移植小鼠GVHD,延长其生存时间,可能与升高CD_4~+CD_(25)~+T细胞水平及促进Foxp3 mRNA表达而发挥免疫抑制效应有关.THH和CsA小剂量联合应用有协同作用.