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基因4型文献资料
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检测猪粪便中基因4型戊型肝炎病毒的实时荧光定量RT-PCR方法的建立
针对基因4型戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)基因组ORF3设计特异性引物和探针,建立了一套TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法.评价了该方法的准确性和灵敏性,同时与常规RT-PCR和巢式RT-PCR方法进行了对比分析.结果表明,生成的标准曲线显示各浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数(r2)为0.994,斜率为-3.312,PCR效率为100%.组内和组间重复性试验相同稀释度标准质粒Ct值之间差异均不显著,并且能够准确的从HEV阳性猪粪便样品中检测到基因4型HEV RNA,具有较好准确性.可检测到戊型肝炎病毒数量为(1.7×10~1)copies,比普通RT-PCR的灵敏度高100倍,比Nested RT-PCR高10倍.
