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用显微切割技术和催化信号扩增法检测何杰金病瘤细胞(H/RS)中的人巨细胞病毒
为明确何杰金病(Hodgkin's disease,HD)瘤细胞中是否存在人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染,采用显微切割技术结合PCR方法检测HD组织及其瘤细胞Hodgkin/Reed-Sternberg(H/RS)中的HCMV核酸;采用免疫组织化学催化信号扩增(catalysed signal amplification,CSA)法检测HD中HCMV的立即早期抗原、早期抗原和基质蛋白.结果在54例HD中选取13例HD的H/RS细胞,经显微切割分离后有4例(30.8%)经PCR扩增出HCMV的核酸;54例HD组织中,经PCR检测有10例(18.5%)扩增出HCMV的核酸;CSA染色显示有6例(11.1%)HCMV立即早期抗原和早期抗原(DDG9/CCH2)阳性,5例(9.3%)基质蛋白(AAC10)阳性.对照的17例反应性增生淋巴结中HCMV核酸的PCR检测,以及三种HCMV抗原的CSA检测,均为阴性.表明HD组织的H/RS细胞中存在HCMV核酸和抗原,而反应性增生淋巴结中不存在,提示HCMV可能参与了何杰金病的发病过程.
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组织内微量抗原的催化信号扩增法检测
目的探讨催化信号扩增法(catalyzed signal amplification, CSA)在检测组织内微量抗原中的作用及意义.方法分别应用免疫组织化学ABC法和CSA法, 对54例霍奇金淋巴瘤(Hodgkin ' s lymphoma, HL)和1例人巨细胞病毒(human cytomegalovirus, HCMV)感染的对照涎腺组织中, HCMV的立即早期抗原DDG9、早期抗原CCH2和低基质蛋白抗原AAC10进行检测, 并比较阳性信号的强弱及阳性率.结果应用ABC法, 仅在1例对照组织中检测到DDG9、CCH2及AAC10的弱阳性信号, 在54例HL中, 未检测到任何阳性信号; 而应用CSA法不仅对照组织中DDG9、CCH2及AAC10均呈强阳性, 而且有6例(11.1%)HL DDG9/CCH2呈阳性, 5例(9.3%)HL AAC10呈阳性.结论 CSA是一种较ABC法敏感的免疫组织化学染色方法, 可检测出ABC法未能检测出的组织内微量抗原.