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重组酶聚合酶扩增(RPA)文献资料
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双重荧光RPA扩增方法快速鉴别两种血清型水泡性口炎病毒
本研究利用重组酶聚合酶扩增(RPA)技术,根据水泡性口炎病毒印第安纳型(VSV-IND)和新泽西型(VSV-NJ)相对保守的L基因为靶序列设计并筛选出两套特异性的引物和探针,建立了快速鉴别检测水泡性口炎病毒两种血清型的双重荧光RT RPA方法.试验结果表明,该方法特异性强,与猪水泡病病毒(SVDV)、口蹄疫病毒(FMDV)、蓝舌病病毒(BTV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、猪瘟病毒(CSFV)等灭活抗原核酸无交叉反应;灵敏度高,低可检测核酸浓度为12.7 fg/μL;简便快速,反应时间短(＜15 min),且重复性好.利用所建立方法对124份临床样品进行检测,结果与双重荧光RT-PCR一致.本文为VSV-IND和VSV-NJ的快速鉴别检测提供一种新方法,尤其适合现场检疫或基层实验室的快速检测.
