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残余牛血清文献资料
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残余牛血清蛋白ELISA检测方法的建立及其初步应用
建立检测疫苗中残余牛血清蛋白(CSP)含量的ELISA检测法.将混合的小牛血清分别免疫鸡和家兔,然后分别提取、纯化鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)和兔抗小牛血清抗体IgG.IgY用作包被抗体,IgG用作酶标抗体,四甲基联苯胺(TMB)显色检测残余CSP含量.结果:包被用IgY的适浓度为25-30μg/mL,用含0.4%明胶的0.01mol/LPBS(pH7.4)溶液作为包被缓冲液,HRP-IgG的适稀释度为1:2000-1:3000.该方法的检测灵敏度为2.5ng/mL,变异系数为6.3%-9.4%,回收率为90.4%-112.8%,与猪、猴、豚鼠血清皆无交叉反应.10批不含Al(OH)3的疫苗ELISA法与RPHA法(反相间接血凝法)检测结果无显著性差异(P＞0.05);而10批含Al(OH)3的疫苗,两种方法检测结果相差很大(P<0.05).建立的ELISA检测法不受Al(OH)3的影响,简便、特异和灵敏,更适用于检测生物制品中的残余CSP.
