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将人的皮肤成纤维细胞直接诱导为神经干细胞
目的 探讨将人的皮肤成纤维细胞诱导为神经干细胞.方法 将成人的皮肤成纤维细胞用带有Pax6报告基因和绿色荧光蛋白的慢病毒感染,并经历其病毒载体的抗性基因嘌呤霉素筛选后的细胞作为初始细胞,转入在维持神经干细胞生长发育、分化、保持功能稳定性和可塑性中起非常重要作用的10个基因Sox2、Klf4、c-Myc、Tcf3、Ascl1、Brn2、Neurog2、Foxg1、Hes1和Id1,对经过重新编程表达GFP绿色荧光蛋白的细胞用流式细胞仪进行筛选,并对其进行免疫荧光染色和分化的鉴定.结果 转入基因后成功诱导为神经干细胞(iNSCs).iNSCs能表达神经干细胞的标志性基因(Nestin),能分化为神经元(βⅢ-tubulin)和星形胶质细胞(GFAP).结论 通过转入外源因子的方式可以将人的皮肤成纤维细胞诱导为神经干细胞.
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诱导神经干细胞的研究进展及应用前景
诱导神经干细胞(induced neural stem cells,iNSCs)是通过在成体细胞内转入特定外源因子而获得.目前主要有两种途径获得iNSCs,即直接诱导法和间接诱导法(需经历重编程过程中不稳定的中间状态).与诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)、胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)比较,iNSCs直接将成体细胞重编程为神经干细胞,而不经过iPSCs再分化为神经干细胞,可减少其致瘤性,缩短诱导周期,提高转分化效率,这将使其更适于临床应用.本文就iNSCs的研究进展,应用前景加以综述.
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诱导神经干细胞与诱导多能干细胞在同源宿主脑内的致瘤性及免疫原性研究
目的 对比研究诱导神经干细胞(iNSCs)与诱导多能干细胞(iPSCs)在同源宿主脑内的致瘤性及免疫原性.方法 采用脑立体定向仪将1×106个C57BL/6(B6)小鼠胚胎干细胞(ESCs)、iPSCs、神经干细胞(NSCs)及iNSCs分别移植到健康成年B6小鼠大脑运动皮层.于移植后14 d、28 d处死动物,取材进行形态学研究.结果 IPSCs和ESCs均可在小鼠脑内形成肿瘤导致组织坏死和免疫细胞浸润.然而,在iNSCs和NSCs移植组内,本研究未观察到肿瘤形成、脑损伤及免疫排斥反应.结论 INSCs移植物不具有致瘤性和免疫原性,因而较iPSCs移植物更安全.
