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大鼠骶尾腹内侧肌的运动神经分布--CB-HRP、CB-胶体金结合CGRP免疫组织化学双标法研究
目的通过研究Onuf核靶肌肉的神经分布特点,探讨在某些运动神经元疾病中,Onuf核及其靶肌肉功能不受影响的生理机制. 方法应用CB-HRP逆行示踪技术及CB-胶体金逆行示踪结合CGRP免疫组织化学双标技术,观察了支配大鼠骶尾腹内侧肌的运动神经元在脊髓内的定位分布. 结果首次发现该肌的神经分布方式与会阴肌的神经分布相同,即同时接受脊髓前角躯体运动神经元和Onuf核神经元的双重支配.其中有63.40%位于L6～S3前角的腹侧群,22.30%位于Onuf核的背外侧群,14.30%位于Onuf核的背内侧群.各核群内支配该肌的神经元约50%为CGRP阳性神经元.另外,支配该肌的上述两种运动神经元在L6～S3节段软脊膜处特定部位形成丰富的软脊膜下树突丛. 结论实验证实了骶尾腹内侧肌不但是Onuf核大的靶肌肉,而且支配该肌的运动神经元具有丰富的软脊膜下树突丛,从而为深入探讨Onuf核的神经化学以及神经病理学提供了新的研究范围.
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5-HT2A、5-HT7受体在大鼠脊髓Onuf核分布的形态学研究
目的:探讨5-HTZA、5-HT7,受体在雄性大鼠脊髓Onuf核不同运动神经元内分布及其与泌尿生殖功能中枢调控的关系.方法:成年SD大鼠10只(雄性8只、雌性2只),随机分为性别对照组(n=4,雌雄各2只)和逆行示踪组(雄性大鼠,n=6).性别对照组取脊髓L5～6节段,切片后作5-HTZA或5-HT7受体免疫组化染色;逆行示踪组采用重组伪狂犬病毒株(PRV-152)分别注入右侧尿道外括约肌(Eus组;n=3)或右侧坐骨海绵体肌(Ic组;n=3),4d后取L5-6节段,切片后作5-HT2A或5-HT7受体双标记荧光免疫组化染色.分别在光镜或激光共聚焦显微镜下观察5-HT2A、5-HT7受体在Onuf核的分布情况.结果:5-HT2A受体的免疫产物主要位于Onuf核背外侧核的内侧,5-HT7受体则主要位于背外侧核的外侧;雄性大鼠5-HT2A、5-HT7受体在Onuf核的表达明显强于雌性大鼠.免疫荧光双标记显示5-HT2A受体的免疫标记主要分布于支配IC的运动神经元周围,5-HT7受体主要分布于支配EUS的运动神经元.结论:5-HT2A、5-HT7受体不均匀分布在Onuf核支配不同的盆底横纹肌的运动神经元.5-HT2A受体可能主要参与性反射的调节,5-HT7受体则可能主要参与泌尿反射的调控.
关键词： 5-羟色胺受体(5-HTR) Onuf核 逆行神经示踪 反射 -
nNOS阳性神经元支配雄性大鼠球海绵体肌和坐骨海绵体肌
为了证实一氧化氮是否参与调节球海绵体肌和坐骨海绵体肌的功能,本研究用CB-HRP逆行追踪结合nNOS免疫细胞化学的技术,对支配雄性大鼠球海绵体肌和坐骨海绵体肌的神经元进行了研究,并结合NADPH-d组化技术对雄性大鼠腰、骶髓的NADPH-d阳性细胞和突起的分布进行了观察.结果发现:(1)支配球海绵体肌和坐骨海绵体肌的Onuf核内存在着CB-HRP与nNOS双重反应细胞、CB-HRP阳性细胞、nNOS阳性细胞nNOS阳性细胞还可见于后连合核、骶副交感核、背角等部位.(2)NADPH-d阳性神经元在腰、骶髓主要位于中央管周围、后连合核、骶副交感核、背角等部位.本研究为NO作为神经活性物质参与球海绵体肌和坐骨海绵体肌功能的调节提供了形态学证据.
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P物质阳性神经纤维对球海绵体肌和坐骨海绵体肌运动神经元的支配一HRP逆行示踪与免疫细胞化学研究
本研究应用HRP逆行示踪与免疫细胞化学相结合的双重反应技术观察了P物质纤维与前角躯体运动神经元的关系.用WGA-HRP经大鼠球海绵体肌和坐骨海绵体肌注射后,逆行示踪标记的运动神经元分布于L5和L6脊髓前角的背内侧核和背外侧核内侧部.SP能纤维广泛分布于脊髓灰质,其中以后角为密集.光镜下可见在前角的背内侧核和背外侧核内,SP阳性纤维呈点状和带有钮扣状膨大的纤维分布于逆行标记的运动神经元周围.电镜下可见SP阳性纤维终末含有少量的大型囊泡和多量的清亮小泡.常见SP阳性纤维末梢与HRP逆行标记的运动神经元有紧密联系,并证明二者形成突触结构.本研究首次证实脑下行P物质阳性纤维对调控球海绵体肌和坐骨海绵体肌运动神经元有直接支配关系,提示P物质能纤维参与阴茎勃起和射精过程.
