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传代次数对人胶质瘤U87细胞系生物学特性的影响
目的 探索不同传代次数对人胶质瘤U87细胞系生物学特性的影响及其分子机制.方法 以两种不同传代次数的U87(Ⅰ)、U87(Ⅱ)为研究对象,使用MTT细胞增殖实验、Transwell小室迁移实验及Boyden小室侵袭实验分别检测U87细胞的增殖、迁移和侵袭能力;使用Western Blot技术检测U87(Ⅰ)及U87(Ⅱ)的CTHRC1,FOXM1,PLOD2,MMP9,TGF-β,E-cadherin,Slug,Snail,Vimentin,PI3K,p-PI3K,Akt,p-Akt的表达量差异.结果 U87(Ⅰ)较U87(Ⅱ)更容易形成网状结构,有更强的侵袭能力,但在增殖和迁移能力上二者无明显差异.在EMT相关蛋白表达水平上,U87(Ⅰ)中的Snail、Vimentin的表达量较U87(Ⅱ)的高,而E-Cadherin、Slug则较低;在PI3K/Akt通路蛋白表达水平上,U87(Ⅰ)的p-Akt,Akt的表达量均低于U87(Ⅱ),而p-PI3K的表达量却高于U87(Ⅱ),两者在PI3K的表达量上无明显差异;除此之外,U87(Ⅰ)中PLOD2、CTHRC1及MMP9的表达量也明显高于U87(Ⅱ),而TGF-β的表达量则低于后者.结论 随着传代次数的增加,U87细胞在侵袭能力以及多个促癌基因表达上发生了变化,这可能造成分子机制研究的前后结果不一致,降低结果的可信程度,因此研究人员在进行细胞系实验时,应尽可能在短时间内,使用同一批次细胞完成生物学特性、分子机制研究,以减少传代次数对肿瘤细胞系生物学特性以及基因表达的影响.
