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二氢乙啶染色文献资料
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17α雌二醇对转基因细胞株(APP/PS1N2a)β-淀粉样蛋白生成的影响
目的 探讨17α雌二醇(E2α)对稳定表达人β-淀粉样前体蛋白(APP)/早老因子-1(PS1)即APP/PS1基因的神经母细胞瘤细胞株(Neuro-2a)(APP/PS1 N2a)β-淀粉样蛋白(Aβ)产生的影响及可能机制.方法 将APP/PS1 N2a细胞用10×10-9mol/L E2α预处理2d,更换培养液后,分别进行如下处理:1.加入不同浓度E2d(25nmol/L、50nmol/L、100nmol/L、200nmol/L)和溶媒(对照组),用免疫印迹法(Western blotting)检测APP/PS1 N2a 细胞内和细胞外的Aβ蛋白水平及细胞BACE1蛋白水平;2.加入100nmol/L E2α、20nmol/L葡萄糖和5mIU葡萄糖氧化酶(GOX).24h后,进行二氢乙啶(DHE)染色观察APP/PS1 N2a细胞中活性氧(ROS)含量的变化.结果 不同浓度E2α(25 nmol/L、50nmol/L、100nmol/L、200nmol/L)处理后,细胞外Aβ蛋白水平明显减少,差异具有统计学意义(P＜0.05);而细胞内Aβ蛋白水平无明显变化(P＞0.05);细胞β-分泌酶-1(BACE1)的表达水平无明显变化(P＞0.05);E2α可以减少G/GOX所致APP/PS1 N2a细胞ROS的产生.结论 E2α可以减少细胞外Aβ的产生,其机制可能与抗氧化损伤有关.
