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p-AKT,p-ERK在胃癌组织中表达及其意义
目的 探讨P13K/AKT及ERK信号通路在胃癌组织中的表达及意义.方法 采用免疫组织化学方法及Western blot方法检测p-AKT、p-ERK在胃癌、癌旁及胃组织正常黏膜中的表达情况.结果 p-AKT及p-ERK在胃癌、癌旁及胃组织正常黏膜中均有不同程度的表达,三组相比差异具有统计学意义.Western-blot结果显示,p-AKT及p-ERK蛋白表达与分化程度相关.结论 p-AKT、p-ERK在胃癌中均高表达,二者的表达均与肿瘤组织分化程度相关,联合检测对胃癌的预防和治疗具有重要意义.
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子宫内膜异位症患者在位内膜Stathmin的表达研究
目的 探讨Stathmin在子宫内膜异位症在位内膜及正常妇女子宫内膜中的表达. 方法 收集子宫内膜异位症患者在位子宫内膜36例和对照妇女的子宫内膜组织20例.通过免疫组化和免疫蛋白印迹法(Western-blotting)检测Stathmin的表达. 结果 Stathmin在子宫内膜的腺体和基质中均有表达,且在增殖期和分泌期的表达无显著性差异(P＞0.05).Stathmin在子宫内膜异位症在位内膜的表达明显高于在对照组妇女子宫内膜中的表达(P＜0.05). 结论 Stathmin在子宫内膜异位症在位内膜的表达增高,可能参与子宫内膜异位症的发病.
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3种抗双链DNA抗体检测对系统性红斑狼疮的诊断价值
目的 探讨间接免疫荧光法(IIF)、酶联免疫吸附试验(ELISA)及免疫印迹法(IBT)3种方法检测抗双链DNA抗体的差异,并分析3种方法联合检测在系统性红斑狼疮(SLE)临床诊断中的应用价值.方法 选取确诊的30例SLE患者,同时选取这一时期来我院进行体检健康者和其他免疫病患者各60例.分别用以上3种方法对3种人群的抗双链DNA抗体进行检测,比较3种检测方法及3种方法联合检测的灵敏度和特异度.结果 IIF特异度高,而ELISA的灵敏度高;3种检测方法联合应用时,其特异度及灵敏度均有所提高.结论 3种方法联合检测时,不仅能够提高检测灵敏度,还能够提高检测的特异度.
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间接免疫荧光法联合免疫印迹法检测自身免疫性肝炎抗体的临床价值
目的：探讨多种免疫学方法联合检测自身免疫性肝炎（AIH）抗体在 AIH 诊断中的价值。方法选用289例健康体检患者、AIH 患者及病毒性肝炎患者，采用间接免疫荧光法检测 ANA（抗核抗体），免疫印迹法检测抗线粒体抗体 M2（AMA-M2）、抗肝肾微粒体抗体Ⅰ型（LKM-1）、抗肝细胞溶质抗原Ⅰ型抗体（LC-1）、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体（SLA/LP）和抗平滑肌抗体（SMA）。结果AIH 组采用间接免疫荧光法检测 ANA 的阳性率和免疫印迹法检测 SMA、LKM-1、LC-1明显高于健康体检及病毒性肝炎组，而 AMA-M2在原发性胆汁性肝硬化（PBC）中阳性率可达94.3％，而原发性硬化性胆管炎（PSC）则很少检测出自身抗体。结论免疫印迹法和间接免疫荧光法联合检测 AIH 的相关抗体，可提高 AIH 的诊断率，也可鉴别 AIH，PBS，PSC 3种自身免疫性肝病。
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艾滋病合并结核病的临床分析
目的探讨艾滋病合并结核病的临床特点.方法对1998年至2002年湖北省及武汉市艾滋病、结核病的定点诊疗机构即湖北省中南医院、武汉市传染病医院、武汉市结核病医院(所)11例艾滋病合并结核病进行临床分析.艾滋病经E1asa法查HIV抗体初筛、免疫印迹法确认.结核病经细菌学、组织学以及临床试验性抗结核治疗诊断.
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补充验证试验在抗-HCV检测中的应用
[目的] 探讨补充验证试验在一般人群抗-HCV检测中的应用.[方法] 应用重组免疫印迹实验(RIBA)对血清抗-HIV酶联检测结果阳性者进行抗-HCV确认,并应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HCV RNA.[结果] 2002～2003年福州市部分人群血清抗-HCV酶联检测的阳性率为0.59%,低于贵州出入境人群和部分地区无偿献血员的抗-HCV检出率,而与长沙和南京地区无偿献血员的检出率相近.抗-HCV酶联检测阳性者经RIBA确认,仅1例阳性,6例为阴性,另有5例结果为不确定.5例不确定者的血清经RT-PCR检测HCV RNA,结果均为阴性.[结论] RIBA和RT-PCF作为抗-HCV酶联检测的补充试验有助于抗-HCV检测结果的确认和解释,可在抗-HCV中推广应用.
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免疫印迹法检测HIV抗体出现假阳性的结果
2007年4月,烟台国际旅行卫生保健中心采用ELISA法对出入境人员进行艾滋病感染初筛时,发现1份HIV抗体检测结果为强阳性血清.随即将阳性血清送山东国际旅行卫生保健中心采用ELISA法复检,结果仍为强阳性;采用免疫印迹法(WB)进行确认,结果出现gp160、p24双条带.然而在对受检者进行流行病学调查时,其强烈否认有高危性行为,怀疑检测结果的可靠性.随后,阳性血清被送往北京国际旅行卫生保健中心艾滋病确证中心实验室采用免疫印迹法进行疑难确证,结果同样出现gP160、p24双条带.进一步用核酸定量检测(NASBA)进行HIV载量检测,结果为阴性.因此,建议作为HIV抗体阴性不确定进行随访.后经1年的多次随访检测,终排除了其HIV感染.上述情况表明,对WB检测结果仅出现gp160和p24条带的样本直接判定为阳性具有一定的风险,必须结合核酸检测等辅助检测方法和流行病学调查结果综合考虑,艾滋病实验室在出具检测结果报告时,一定要慎重.
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间接免疫荧光法联合免疫印迹法检测自身免疫性肝炎的应用价值分析
目的：：分析探讨间接免疫荧光法联合免疫印迹法检测自身免疫性肝炎( AIH)的应用价值。方法：选取我院收治的50例AIH患者作为AIH组,同期50例病毒性肝炎患者作为病毒组,身体健康人员50例作为健康组。采用间接免疫荧光法测定受检人员的抗核抗体( ANA)、抗平滑肌抗体( ASMA)、抗中性粒细胞胞浆抗体( ANCA),免疫印迹法测定抗溶性肝抗原/肝-胰腺(SLA/LP)、抗肝细胞溶质-1(LC-1)、抗α-氨基-3-羟基-5-甲基异唑-4-丙酸(AMPA)受体抗体。分析比较3组受检人员的ANA、ASMA、ANCA、SLA/LP、LC-1、AMPA检测结果和这几项指标在AIH 患者临床评价指标。结果：AIH组中,ANA、ASMA、ANCA、SLA/LP、LC-1、AMPA的阳性率明显高于病毒组和健康组,病毒组中的ANA、ASMA、ANCA的阳性率明显高于健康组,差异有统计学意义( P<0.05)；SLA/LP、AMPA的灵敏度、特异性、有效性、阴性预测值、阳性预测值较高,差异有统计学意义( P<0.05)。结论：间接免疫荧光法联合免疫印迹法在AIH的检测中有较高的应用价值,值得推广应用。
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不同检验方法在幽门螺杆菌检查中的临床应用效果比较
目的:探讨免疫印迹法和胶体金法在幽门螺杆菌临床应用的效果比较.方法:本次临床研究选取的是2016年1月至2017年3月所收集的120份临床样本,将这些样本分别使用免疫印迹法以及胶体金法进行检测,对这两种检测方法的阳性符合率、阴性符合率以及总符合率进行统计分析.结果:免疫印迹法检测幽门螺杆菌的阳性符合率为78.3％,阴性符合率为21.7％;胶体金法检测幽门螺杆菌的阳性符合率为77.5％,阴性符合率为22.5％.这两组检测方法的符合率经统计学检验差异无统计学意义(P＞0.05).结论:经过免疫印迹法与胶体金法对幽门螺杆菌的120份样本的临床检测,免疫印迹法与胶体金法的阳性率符合率达到了99％,产品质量符合临床应用要求.
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间接免疫荧光法检测抗核抗体与免疫印迹法检测抗核抗体谱结果分析
目的:探讨间接免疫荧光法(IIF)检测抗核抗体(ANA)与线性免疫印迹法(LIA)检测抗核抗体谱(ANAs)在自身免疫性疾病临床诊断中的价值.方法:ANA用IIF法检测;ANAs用LIA法检测,并对两种检测结果加以比较分析.结果:用IIF法检测ANA 300例,用LIA法检测ANAs 263例,ANA-IIF法与ANAs-LIA法检测阳性结果无显著性差异(P＞0.05);30例同时进行ANA-IIF法与ANAs-LIA法检测,结果一致率73.3%;ANAs-LIA法漏检率20%;错检率6.7%.结论:以IIF法检测ANA缺乏特异性,而用LIA法检测ANAs具有高特异性,但存在着较高漏诊率,因此在临床实际应用中两种方法不能相互取代,应联合应用.
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ADAMTS-1与MMP-9蛋白在宫颈癌中表达情况的研究
目的：探讨宫颈癌中ADAMTS-1与MMP-9蛋白表达情况及意义。方法收集本院2008年1月-2012年9月妇科收治的宫颈癌（实验组）37例、高级别宫颈上皮内瘤变26例与正常宫颈（对照组）10例样本。免疫印迹法检测各组ADAMTS-1与MMP-9蛋白相对表达。结果方差分析结果显示，实验组ADAMTS-1表达量明显高于高级别上皮内瘤变组织（F=0.016， P=0.050），低于与对照组（F=-0.4306，P＜0.001）。实验组MMP-9蛋白的表达量明显高于高级别上皮内瘤变组织（F=0.3185， P＜0.001）与对照组（F=0.4477，P＜0.001）。实验组中ADAMTS-1与MMP-9蛋白的相对表达量呈负相关（P＜0.05）。结论ADAMTS-1与宫颈癌中的发生有关，且可能通过上调MMP-9蛋白的表达途径实现。
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宁波地区过敏性结膜炎患儿过敏原检测分析
采集2011年10月至2015年9月,宁波市眼科医院门诊收治的434例过敏性结膜炎患儿,采用免疫印迹法(immunoblotting test,IBT)对434例患儿进行过敏原检测.对宁波地区过敏性结膜炎患儿进行过敏原检测及分析,筛查儿童过敏性结膜炎常见过敏原,分析其分布和年龄及季节的关系.采用x2检验对检测结果进行分析,P＜0.05为差异有统计学意义.结果显示,434例过敏性结膜炎患儿总特异性IgE抗体(sIgE)阳性率64.06％ (278/434),男性患儿sIgE阳性率65.67％ (153/233),女性患儿sIgE阳性率62.19％ (125/201),差异无统计学意义(P＞0.05).过敏原阳性率依次为为户尘螨/粉尘螨33.18％(144/434),动物毛皮屑23.04％ (100/434),鱼虾蟹14.29％ (62/434),真菌类11.29％ (49/434),牛奶10.60％ (46/434),鸡蛋7.60％ (33/434).户尘螨/粉尘螨、动物毛皮屑、鱼虾蟹、真菌类、牛奶和鸡蛋在不同年龄组间的分布差异有统计学意义(P＜0.05).婴幼儿组以鱼虾蟹、牛奶和鸡蛋食入性过敏原为主,而学龄前组和学龄组以户尘螨/粉尘螨、动物毛皮屑和真菌吸入性过敏原为主.四个季度的户尘螨/粉尘螨、动物毛皮屑和真菌类过敏原阳性率比较差异有统计学意义(P＜0.05),鱼虾蟹、牛奶和鸡蛋在四个季度间差异无统计学意义(P＞0.05).在宁波地区,户尘螨/粉尘螨、动物皮毛屑和鱼虾蟹在儿童过敏性结膜炎的发病中占主导地位,应根据季节年龄分布特点有针对性的检测,预防过敏性过敏性结膜炎发生.
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国产抗HCV酶联免疫诊断试剂质量分析
目的了解国产抗HCV EIA试剂的质量情况.方法用16种国产抗HCV EIA试剂盒和2种进口试剂对1 426份来源于血站及医院的血清进行了检测,并对疑难样品用RIBA及PCR试剂进行了确证.对各种试剂的灵敏度,特异度及检测的抗体谱进行了分析.结果目前国产试剂灵敏度不低于国外试剂,特异度尚有待于改进.国产试剂漏检及假阳性的主要原因为HCV NS3区抗原相对较弱,抗原纯度较低,用量不足,有待于改进.结论国产抗HCV试剂灵敏度不低于国外试剂,特异度有待提高.
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抗HCV国家参考品的研制
目的建立新的抗HCV国家参考品,促进国产抗HCV试剂的发展.方法从全国各地收集供血员及丙型肝炎病人血样4000多份,应用10多种抗HCV EIA试剂筛选,应用免疫印迹及HCV PCR方法进行确证,并会同26家单位进行会同标定.结果新参考品由40份抗HCV阴性样品及40份抗HCV阳性样品组成,阳性样品中有单独某一种抗体阳性的样品,有同时含有某两种抗体的样品,也有同时含有4种抗体的样品.结论新参考品针对试剂存在的问题及发展方向,对研究开发和筛选高质量的丙肝抗原提供了参考数据,并为国产试剂的质量控制提供了标准.
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抗核抗体谱检测对系统性红斑狼疮诊断价值分析
B淋巴细胞高度活化,生成诸多针对自身组织产生的抗体为系统性红斑狼疮的重要表现.在此其中坑核抗体为重要的一类.结合实际情况,本文全面分析抗核抗体谱(ANAs)在诊断系统性红斑狼疮的价值,旨意为相关学者的研究工作提供参考文献.
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高危人群自愿无偿献血者确认艾滋病病毒抗体阳性一例
献血者男性,年龄24岁,未婚,住河南省上蔡县芦岗乡文楼村王庄,在太原市打工,第一次献血.太原市血液中心化验室用两种ELISA试剂对该献血者的血样进行检测,结果均为阳性.山西省HIV抗体检测确诊实验室用新加坡Jenelabs公司的免疫印迹法(western blot)试剂,对其血样进行检测,结果gp160、gp120、gp66、gp55、gp51、gp41、gp31、gp24、gp17阳性,检测结果HIV-1抗体阳性.随访表明,该献血者来太原打工前,在河南省驻马店地区卖血9次,有一妻一女,在太原随其共同生活.由此可见,该献血者其献血时隐瞒了献血史和婚史.
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汉坦病毒核蛋白的重组表达及其免疫印迹法在肾综合征出血热血清抗体检测中的应用
目的 应用基因工程技术,在昆虫细胞中表达汉坦病毒(HV)S基因,表达产物作为诊断抗原,用于检测血清中抗HV特异性抗体IgG.方法 PCR扩增HV-Z10株N蛋白(NP)编码基因,基因工程方法构建NP编码基因昆虫表达系统rBAC-Z10S-TN.间接荧光法了解重组NP(rNP)表达及与特异性免疫反应情况,SDS-PAGE观察重组蛋白表达情况.建立免疫印迹法检测肾综合征出血热(HFRS)患者血清样品,并与常规间接免疫荧光法进行比较.结果 rBAC-Z10S-TN高效表达rNP,SDS-PAGE显示rNP的蛋白表达带,此抗原仅与HFRS患者血清起反应.经双盲试验,两法检测血清143份,HFRS阳性符合率为97.67％.结论 成功构建了HV-Z10株NP编码基因高效真核表达系统.所建立的免疫印迹法可作为HFRS简便、安全、敏感、特异的血清学诊断新方法.
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细胞增殖抑制基因HSG与COPD中医证型的相关性
目的:通过检测细胞增殖抑制基因(HSG)在慢性阻塞性肺病(COPD)不同中医证型组中表达的差异,为后续检测中药方剂治疗COPD奠定基础,并为COPD中医证型的诊断提供有说服力的客观标准.方法:选取110位COPD急性加重期患者及30位正常人为研究对象,随机分为痰浊组、痰热组、气虚组及正常组.所有入选者空腹抽取血液,用试剂盒提取血液总RNA,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测各组慢性阻塞性肺病急性加重期(AECOPD)患者血清HSG mRNA表达;采用免疫印迹法(Western bolt)检测AECOPD患者血清HSG蛋白表达.结果:痰浊组、痰热组、气虚组与正常组比较有显著性差异(P＜0.05);痰浊、痰热组与气虚组比较有显著性差异(P＜0.05);痰浊与痰热组比较无显著性差异.结论:HSG在AECOPD患者血液中低表达,在正常组血液中高表达;气虚组患者血液中HSG表达低于痰浊、痰热组;HSG的表达水平可能影响了气道重建,HSG与COPD病程发展可能存在着内在的关联,其参与了COPD不同中医证候群的形成.
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痹肿消汤拆方对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜ERK1/2、ERK5表达及其转导通路的影响
目的:检测痹肿消汤按湿、热、毒、瘀拆方对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、细胞外信号调节激酶5(ERK5)表达的影响,从湿、热、毒、瘀探讨类风湿性关节炎(RA)的作用机制.方法:采用皮下注射牛Ⅱ型胶原蛋白与完全弗氏佐剂诱导SD大鼠胶原诱导性关节炎(CIA)模型,并设立正常组.采用免疫印迹法( Western blot)同步检测正常组、模型组、痹肿消汤组、清热解毒组(拆方Ⅰ组)、祛湿组(拆方Ⅱ组)、活血组(拆方Ⅲ组)大鼠在不同时间点滑膜ERK1/2、ERK5的磷酸化水平,运用灰度扫描软件对结果进行半定量分析.结果:造模14d后,模型组滑膜ERK1/2、ERK5表达高于正常组(P＜0.05).随着免疫时间延长,模型组ERK1/2、ERK5表达于21、28d呈递增趋势(P＜0.05),28d达到高.4用药组治疗后,ERK1/2、ERK5的磷酸化表达水平均低于同期模型组(P＜0.05).在21、28d水平,表达呈递减趋势(P＜0.05).痹肿消汤组的ERK1/2、ERK5各时间点的表达水平比拆方3组更低,拆方Ⅱ组的ERK1/2表达的下降幅度比拆方Ⅰ组、拆方Ⅲ组更明显(P＜0.05).而拆方Ⅰ组的ERK5表达的下降幅度比拆方Ⅱ组、拆方Ⅲ组更显著(P＜0.05).结论:拆方各组可有效地抑制ERK1/2、ERK5转导通路的活化,达到阻抑关节滑膜增殖、骨质侵蚀的作用.但清热解毒、祛湿通络、活血祛瘀各治法对上述通路调节作用优势有不同.
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大蒜新素对HCMV主要即刻早期抗原IE72和IE86在人胚肺成纤维细胞中表达的影响
目的:研究大蒜新素对人巨细胞病毒(HCMV)即刻早期抗原(IEAs)在人胚肺成纤维细胞中表达的影响.方法:建立HCMV AD169毒株(MOI为2.5和0.25)感染细胞模型和大蒜新素(IC50和MTC浓度)干预模型.用Western Blot 检测药物处理后感染细胞中HCMV主要IEAs(IE72和IE86)表达强度变化,并与相应浓度更昔洛韦(GCV)的作用效应相比较.结果:在高MOI和低MOI感染时,不同浓度大蒜新素均能使HCMV IE72和IE86表达强度明显下降,对IE86表达的抑制率为IE72的2倍左右.与GCV相比,大蒜新素对IE72的抑制率低于GCV,而对IE86的抑制效应高于GCV.结论:大蒜新素明显抑制HCMV IE72和IE86表达,对IE86的抑制尤为显著,这可能是大蒜新素抑制HCMV增殖的关键作用环节之一.
