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牛瑟氏泰勒虫病PCR诊断方法的建立
为建立一种快速、敏感的牛瑟氏泰勒虫病诊断方法,本实验分离提取牛瑟氏泰勒虫全血基因组DNA,并设计一对编码牛瑟氏泰勒虫32 kDa (P32) 主要表面蛋白基因的引物,进行PCR扩增,预期扩增的片段为875 bp.并对该实验进行特异性、敏感性及临床检测实验.结果成功扩增出了长为875 bp的基因片段,且具有高特异性和很好的敏感性,表明该方法可用于牛瑟氏泰勒虫感染的临床检测.
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抑癌基因p14ARF与p32在喉鳞状细胞癌中的表达及其意义
目的 观察p14ARF与p32在喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)组织中的表达情况及其与临床病理特征的关系,探讨其对LSCC发生发展过程中的影响.方法 分别用荧光定量PCR和免疫组化法检测了50例LSCC组织及对应的癌旁组织中p14ARF与p32的mRNA和蛋白质的表达.采用SPSS 17.0软件进行统计分析.结果 p14ARF mRNA在LSCC组织中的表达水平与肿瘤临床分期相关(x2=20.704,P<0.05),并呈现早期相对上升,晚期相对下降的趋势.p32 mRNA在LSCC组织与癌旁组织中的表达无明显的相关性(t=-0.684,P>0.05).p14ARF蛋白定位肿瘤细胞的细胞质和细胞核,p32蛋白主要定位于细胞浆,两者在蛋白水平上的表达结果与PCR基本一致.p14ARF与p32在LSCC组织中的表达无关联性(r=0.157,P>0.05).结论 p14ARF在LSCC中的异常表达提示其可能参与了肿瘤的早期发生发展过程,并有可能成为LSCC早期诊断的一个分子标志物,而p32可能在LSCC的发生发展过程中并未起到关键的作用.