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  • 基于核酸适配体SERS技术快速检测大肠埃希菌O157∶H7的研究

    作者:王宇田;曲晗;郝良玉;田栢会;高玮村;李楠;王习文;李志萍;易乐;李乾学;夏志平

    目的 基于核酸适配体表面增强拉曼技术(SERS),建立一种快速检测大肠埃希菌O157∶H7的方法. 方法 将大肠埃希菌O157∶H7与其特异性适配体共孵育,采用原位还原纳米银方法在大肠埃希菌O157∶ H7-适配体表面原位还原纳米银颗粒,形成纳米银壳,通过SERS技术特异性检测目标细菌. 结果 在500~1 900 cm-1范围内采集拉曼信号,在735 cm-1、1 331 cm-1、1 578 cm-1处发现拉曼特征峰.对检测到的拉曼信号峰进行归属分析,735 cm-1来自胞嘧啶与尿嘧啶的代谢产物,1 331 cm-1归属于鸟嘌呤代谢产物,1 578 cm-1归属于蛋白质中酰胺Ⅰ和酰胺Ⅲ.将大肠埃希菌O157∶H7、单增李斯特氏菌、肠炎沙门氏菌、福氏志贺氏菌、大肠埃希菌DH5α混合,通过SERS可快速检出目标细菌大肠埃希菌O157∶H7.试验的重复性良好,低检测限为10 cfu/ml. 结论 基于核酸适配体SERS技术,建立的大肠埃希菌O157∶H7快速检测方法的特异性和灵敏性高、操作简单、省时,费用低,可用于临床大肠埃希菌O157∶H7感染的快速检测.

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