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恶性疟原虫FCC-1/HN株文献资料
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恶性疟原虫FCC-1/HN株pcDNA3-EBA175/HRPⅡ重组质粒直接注射小鼠骨骼肌的体内表达
为观察恶性疟原虫FCC-1/HN株pcDNA3-EBA175/HRPⅡ重组质粒经肌肉途径接种后在宿主体内的表达.BALB/c小鼠分为3组,1组(实验组)经后腿股四头肌注射重组质粒pcDNA3-EBA175/HRPⅡ100 μg;2组(实验对照组)注射空白质粒pcDNA3 100 μg;3组(正常对照组)注射PBS(pH7.4)100 μl.每隔20 d加强注射,于第1次接种后20 d和第2次接种后10 d取小鼠双侧股四头肌免疫组化染色,于第3次接种后40 d取小鼠各组织作聚合酶链反应(PCR)检测目的基因.结果显示,(1)1组经重组质粒免疫小鼠血清、恶性疟原虫抗原免疫小鼠血清、恶性疟原虫人工合成九肽HRPⅡ单克隆抗体及抗恶性疟原虫全虫抗原单克隆抗体作用,免疫组化染色后,在注射部位肌肉组织的肌膜、肌间隙处见到褐色分泌颗粒;1组未注射侧肌肉组织、2组及3组均未见褐色颗粒.(2)采用PCR从1组肌肉、心脏、肝脏、肺脏和肾脏组织扩增出目的基因EBA175和HRPⅡ,2组及3组相应组织均未扩增出目的基因片段.本研究为疟疾多基因DNA疫苗的研制提供了体内表达的依据.
