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H9N2亚型AIV HA蛋白第226位点氨基酸多样性分析及3株病毒受体结合能力检测
目的 了解目前我国家禽业中流行的H9N2亚型AIV的HA蛋白第226位氨基酸残基的多样性,并用固相糖链ELISA方法检测实验室保存的3株H9N2亚型AIV病毒的受体结合能力. 方法 从NCBI数据库中下载我国分离的H9N2流感病毒的HA氨基酸序列,对其第226位(参照H3亚型HA位点)氨基酸残基的种类进行统计分析,并利用固相糖链ELISA方法对3株H9N2亚型AIV的受体结合能力进行检测. 结果 与H9N2流感病毒受体结合能力相关的HA226位点已呈现出多样性,分别为HAL226、HAQ226、HAM226和HAF226,其占有比率分别为81.85%、17.57%、4.81%和0.11%;进一步统计分析表明,我国近几年分离的H9N2流感病毒以HAL226为主.受体结合能力检测显示,CK/JN/3(HAL226)只具有结合人样受体的能力,CK/JL/06 (HAQ226)只具有结合禽样受体的能力,而CK/JN/2(HAF226)则具有双受体结合特性,其中与人样受体结合能力稍高. 结论 当前我国家禽中流行的H9N2亚型AIV中以具有HAL226位点特征的毒株占优势,而这一位点特征与病毒结合人样受体有关.因此,H9N2亚型AIV具有突破种间屏障并引发新的流感大流行的潜在威胁.
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人肿瘤坏死因子α组合突变体生物学特性的研究
目的研究 hTNFα的结构与功能。方法比较了野生型 hTNFα与其单突变体 R2K-、 N30S-、 R32W-和 L157F-hTNFα及两种组合突变体 R32W-L157F-hTNFα和 R2K-N30S-R32W-L157F-hTNFα的细胞毒活性、受体结合能力,以及动物体内毒性。结果发现两种组合突变体基本保持了与野生型相当的对人肿瘤细胞的细胞毒活性,但对小鼠 L929细胞的活性明显下降;两种组合突变体与 hTR75的结合能力的下降程度要大于 hTR55;小鼠体内毒性测定实验表明,两种组合突变体的毒性显著降低,其中双突变体的 LD50为野生型的 300倍左右,而四突变体对小鼠的体内毒性比野生型下降了 700倍以上;四突变体对恒河猴的体内毒性也比野生型 hTNFα明显降低。结论获得具有潜在应用价值的 TNF-α四突变体。
关键词: 人肿瘤坏死因子α突变体 细胞毒活性 受体结合能力 动物体内毒性