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上海口岸1只进境犬携带蜱的种类鉴定与溯源分析
目的 对上海口岸截获的德国成犬体表蜱进行种类鉴定及溯源分析.方法 2016年11月28日在上海口岸进口的69只德国警犬中的第33号警犬右前肢内侧检获蜱1只,对其进行形态学鉴定,并提取其DNA,扩增线粒体16S rRNA基因进行测序、比对,并对感染途径进行溯源分析.结果 形态学鉴定该蜱符合血蜱属的形态特征,分子鉴定表明该蜱的线粒体基因序列与广泛分布于古北区和东洋区的褐黄血蜱(Haemaphysalis flava Neumann,1897)线粒体基因匹配度达98％.结论 截获蜱为褐黄血蜱,为犬入境后感染.
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基于16S rDNA和CO Ⅰ基因的3种血蜱分子生物学鉴定
目的 利用16S rDNA基因及线粒体DNA细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(cytochrome oxidase subunit Ⅰ gene,COⅠ)基因建立3种形态学特征相近的血蜱属蜱类-长角血蜱、褐黄血蜱及铃头血蜱的分子生物学鉴定方法,探讨它们的系统发生关系. 方法 在上海市动物体表采集寄生蜱,在解剖显微镜下进行形态学鉴定后,提取蜱样本基因组DNA,采用PCR方法从蜱基因组中扩增16S rDNA及CO Ⅰ基因,测序后进行同源性分析,用Mega 6.0软件分别构建系统发生树并进行系统进化分析. 结果 3种血蜱中长角血蜱的16S rDNA序列和CO Ⅰ序列与GenBank中的长角血蜱的16S rDNA序列和CO Ⅰ序列同源性分别为96.0％～97.2％,96.9％～98.8％;褐黄血蜱的16S rDNA序列和CO Ⅰ序列与GenBank中的褐黄血蜱的16S rDNA序列和CO Ⅰ序列同源性分别为95.9％～98.3％、87.1％～91.9％;铃头血蜱的16S rDNA序列与GenBank中来自日本的铃头血蜱(AB819170)的16S rDNA序列同源性为97.5％;3种血蜱16S rDNA基因之间的同源性分别为88.0％、87.0％、86.9％,CO Ⅰ基因之间的同源性分别为80.4％、80.8％、82.8％.用16S rDNA及CO Ⅰ基因构建系统发生树中,长角血蜱、褐黄血蜱分别与已知的长角血蜱和褐黄血蜱聚在一起,长角血蜱、褐黄血蜱均形成独立的分支. 结论 在传统形态学分类的基础上结合分子生物学鉴定方法能更准确地鉴定蜱的种类,并能更好地了解其系统发育进化关系.
