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两种生物活性植骨材料对小鼠骨髓干细胞增殖和分化的影响
生长因子作用于拔牙后的牙槽窝,有可能阻止或减少牙槽骨的破坏吸收,从而维持牙槽骨原有的结构.为了奠定临床拔牙后、牙槽嵴位点保留的实验基础,本研究首先通过乳液交联法合成壳聚糖微球,负载生长因子BMP-2及脂联素(APN),再将其复合于小牛松质骨支架形成生物活性植骨材料.将两种生物活性材料与小鼠前成骨细胞(MC3T3-E1)共培养,比较材料对细胞增殖和分化的影响.结果表明,负载BMP-2的缓释微球表面更为光滑,微球平均直径为9.634 μm.cck-8结果表明,随着BMP-2浓度的增加,细胞增殖速度较脂联素组增加更快.实时定量PCR结果表明,ALP、BMP-2、OCN和Adipor2基因在APN处理组增加倍数高于BMP-2组.Western-Blot结果表明,APN植骨材料更有利于小鼠前成骨细胞MC3T3-E1的增殖和分化.
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自体骨髓间充质干细胞移植与纤维蛋白胶复合骨形态发生蛋白体内成骨的比较研究
目的 比较纤维蛋白胶(FS)复合骨形态发生蛋白-2(BMP-2)与各种自体骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植骨折后体内成骨的效果.方法 20只日本大耳白兔行桡骨中段骨缺损造模.取第2代BMSCs进行成骨诱导.分别将BMSCs联合成骨诱导后的BMscs(A组)、成骨诱导的BMSCs(B组)、BMSCs(C组)、生理盐水(E组)经皮注入兔桡骨中段骨缺损处,FS复合BMP-2于造模手术中植入(D组).通过组织学、放射学、生物力学方法在不同时相比较骨缺损区修复情况.结果 A组在12周内骨缺损区新生骨的数量和质量与D组无显著性差异(P>0.05),但两组均优于B组(P<0.01)和C组(P<0.01),E组骨缺损主要由纤维结缔组织填充.结论 BMSCs联合成骨诱导后的BMSCs、FS复合BMP-2均具有理想的体内成骨能力;BMSCs与成骨诱导后的BMSCs联合移植可能存在协同效应,具有更强的成骨能力,可作为种子细胞应用于骨组织工程.
关键词： 纤维蛋白胶 骨形态发生蛋白-2(BMP-2) 骨髓间充质干细胞 细胞移植 骨缺损 -
骨形态发生蛋白-2对后纵韧带骨化作用
目的 研究骨形态发生蛋白-2(BMP-2)在体外培养的后纵韧带骨化(OPLL)患者及非OPLL,患者非骨化部位韧带上的作用.方法 切取OPLL患者和非OPLL患者的非骨化部位的韧带,观察体外培养条件下OPLL细胞系(8组,编号为OL1～OL8)和非OPLL细胞系(7组,编号为NL1～NL7)的形态学特征,分析不同浓度的人重组骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)对两类细胞系碱性磷酸酶(ALP)活性、DNA及胶原合成、骨钙素分泌的影响,并检测BMP-2在后纵韧带组织中的表达.结果 有4组OL细胞系表达成骨细胞表型,具有高ALP活性,可形成骨小结节,阿尔新兰染色阳性,可分泌骨钙素.而7组NL细胞系的ALP活性均低,仅2组测到少量骨钙素的分泌,不形成骨小结节.免疫组织化学染色显示:BMP-2在退变、软骨化及骨化的韧带组织中均有表达,在正常后纵韧带组织中无表达.rhBMP-2可明显增强OL细胞系的ALP活性、DNA及胶原合成、骨钙素分泌,但仅引起2个NL细胞系(NL4、NL6)的ALP活性增高及骨钙素的分泌.结论 OPLL患者脊柱韧带细胞体外培养可表达成骨细胞表型,非OPLL患者脊柱韧带细胞表达成纤维细胞表型.BMP-2在OPLL的发生中起着重要作用.
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骨形态发生蛋白-2在兔骨折愈合过程中的作用
[目的]利用兔骨折动物模型探讨骨形态发生蛋白-2(BMP-2)对骨折愈合的影响以及BMP-2、转化生长因子-β1 (TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)三者在骨折愈合中的相互关系及机制.[方法]30只新西兰大白兔制作右侧桡骨骨折模型,随机将其分为两组,每组15只.实验组骨折局部注射BMP-2,对照组注射生理盐水.采用X线片、组织形态学检查观察两组骨折愈合的差异,免疫组化染色观察骨折愈合局部BMP-2、TGF-β1及VEGF蛋白的表达变化.[结果]注射BMP-2的实验组兔的骨痂生长、骨质重建、髓腔再通均早于对照组;两组间影像学评分差异有统计学意义(P＜0.05).骨折造模后l、2周BMP-2、TGF-β1、VEGF免疫组化染色的积分吸光度值实验组高于对照组,两组间差异有统计学意义(P＜0.05),3周时BMP-2、TGF-p1及VEGF免疫组化染色积分吸光度值实验组仍明显高于对照组(P＜0.05),而5、7周时,两组间免疫组化染色积分吸光度值无明显差异(P＞0.05).[结论] BMP-2通过促进TGF-βl及VEGF的表达,可促进血管的再生,提高成骨细胞、破骨细胞的数量及活性,促进骨折愈合.
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中药熏洗对复杂胫骨平台骨折术后康复的促进作用
目的:观察自拟活血通络方熏洗对复杂胫骨平台骨折术后气滞血瘀证患者康复的促进作用及对血清中骨形态发生蛋白-2 (BMP-2) 水平的影响.方法:选取86例复杂胫骨平台骨折术后气滞血瘀证患者, 按随机数字表法分为对照组和观察组各4 3例.对照组予术后常规抗炎、预防血栓等对症处理.观察组在对照组治疗基础上予活血通络方熏洗, 治疗1月.比较2组的临床疗效、气滞血瘀证症状评分、术后疼痛消失时间和骨折愈合时间, 检测2组患者血清中的BMP-2水平.结果:观察组优良率为9 7.67％, 高于对照组的81.4 0％, 差异有统计学意义 (P＜0.05) .2组气滞血瘀证疼痛、肿胀、瘀斑、口渴、便秘、尿赤积分均较治疗前降低 (P＜0.01), 观察组各症状积分均低于对照组 (P＜0.01) .观察组疼痛消失和骨折愈合时间均较对照组缩短 (P＜0.01) .2组血清BMP-2水平均较治疗前升高 (P＜0.01);治疗3周和6周, 观察组的血清BMP-2水平均高于对照组 (P＜0.01) .结论:在常规治疗基础上加用活血通络方熏洗可加快复杂胫骨平台骨折术后患者临床症状和疼痛的改善, 促进骨折愈合, 其作用机制可能与上调BMP-2表达有关.
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体外冲击波联合仙桃草治疗骨不连对骨痂中BMP-2和VEGF mRNA表达的影响
目的 探讨体外冲击波联合中草药仙桃草疗法对兔桡骨骨不连骨痂中骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 制作120只新西兰大白兔兔桡骨骨不连模型,按随机数字表方法分为A、B、C、D四组,A组为冲击波联合仙桃草治疗组,B组为仙桃草治疗组,C组为冲击波治疗组,D组为对照组.体外冲击波治疗方法:在骨不连两断端部位冲击,冲击量为800次/min,焦点能量0.5 mj/mm2,频率为70～80次/min.于治疗后不同时相点(48 h、1、2、4、6、12周)取材,比较各组标本BMP-2和VEGF的免疫组化表达,并作统计分析.结果 (1)各时相点骨痂中BMP-2的表达:48 h各组相比差异无统计学意义.1、2、4、6、12周各组不同时相点比较,A、C组与D组比较差异有统计学意义(P＜0.05),B组与D组比较差异无统计学意义(P＞0.05),且A组与B、C组比较差异同样有统计学意义(P＜0.05).(2)各时相点骨痂中VEGF的表达:A、B、C组与D组比较差异均有统计学意义(P＜0.05),且A组与B、C组比较差异也有统计学意义(P＜0.05).结论 体外冲击波联合仙桃草疗法可以同时上调BMP-2、VEGF表达,从而刺激成骨,共同促进骨不连愈合.
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骨碎补总黄酮促进大鼠诱导膜中VEGF、BMP-2表达的实验研究
目的 观察骨碎补总黄酮对大鼠诱导膜中血管内皮生长因子(VEGF)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)表达的影响.方法 60只3月龄SD大鼠,随机分为3组:模型组、填充组和填充+TFDR组,每组20只,建立大鼠长段骨缺损模型,模型组骨缺损处仅克氏针固定,填充组及填充+TFDR组骨缺损处用抗生素骨水泥填充,并用克氏针固定;填充+TFDR组ig给予TFDR(67.5 mg/kg),模型组及填充组ig等量生理盐水,每天给药1次,连续6周.给药结束后,处死大鼠,切取骨水泥周围包绕的白色膜状物,模型组切取对应阶段的瘢痕组织,Elisa定量及免疫组化法观察诱导膜中BMP-2、VEGF表达变化.结果 填充组BMP-2、VEGF表达水平显著高于模型组,填充+TFDR组BMP-2、VEGF表达水平均显著高于填充组和模型组,各组间差异均有统计学意义(P＜0.05);免疫组化检测结果显示相同趋势.结论 TFDR促进Masquelet技术诱导膜中BMP-2和VEGF表达.
