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尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶2文献资料
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抗尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶2单克隆抗体的制备与鉴定
本研究制备抗人尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶2(UDP-glucose pyrophosphorylase 2)的单克隆抗体(mAb)并进行初步鉴定.将正常成人肝组织匀浆离心并分离肝脏胞浆总蛋白,用肝脏胞浆总蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,通过间接ELISA法、Western blot及免疫组织化学的方法对单克隆抗体进行特性鉴定,通过Uni-ZAP XR肝脏cDNA表达文库筛选鉴定抗体特异性.结果表明:通过间接ELISA筛选获得1株可稳定分泌抗人UGP2 mAb的杂交瘤细胞系BAD062,其分泌的单克隆抗体的Ig亚类(型)为IgG2b(κ),Western blot结果显示该抗体可以特异地识别分子量为56 kD的蛋白;应用单克隆抗体BAD062对人肝脏cDNA表达文库(Uni-ZAP XR)进行筛选,阳性噬茵斑测序结果显示2个阳性克隆插入序列均为UGP2.结论:单克隆抗体BAD062特异地识别抗原UGP2,该抗体可用于ELISA检测、Western blot、免疫组织化学实验,为UGP2的研究提供了有力的工具.
关键词： 尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶2 单克隆抗体 cDNA表达文库
