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  • 依博素生物合成基因ste22的异源置换研究

    作者:郭连宏;张洋;鲍勇刚;白利平;姜蓉;李元

    目的依博素是由链霉菌产生的一种新型胞外多糖,具有显著抗类风湿性关节炎的作用,我们研究已确定了该多糖的生物合成基因簇(ste)。为了对依博素结构进行改造以提高其生物活性,对其生物合成基因 ste22进行了异源置换研究。
      方法采用 PCR 扩增方法从乳酸菌获得了编码葡萄糖糖基转移酶的基因 gtf,通过基因同源重组双交换,从链霉菌中置换了 ste22基因。采用白细胞介素-1合成酶活性测定方法及小鼠巴豆油急性炎症模型,初步确定了基因置换株的依博素衍生物生物活性。
      结果获得了葡萄糖糖基转移酶基因置换株 Streptomyces sp.139(gtf-22),产生了依博素新衍生物 EPS-22g。研究表明该衍生物与依博素相比,葡萄糖比例从2.14%显著上升到48.64%,体外活性实验显示,其对炎症细胞因子白细胞介素-1合成关键酶 ICE 抑制率高于依博素,小鼠巴豆油急性炎症体内活性分析结果证明,该衍生物抑制活性亦高于依博素。
      结论采用异源基因置换生物合成基因的方法改造依博素产生菌,可能是获得生物活性较好新多糖衍生物的一种有效手段。

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