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刺五加内生放线菌Streptomyces sp.CWJ-256次生代谢产物研究
目的 研究刺五加植物内生放线菌CWJ-256次级代谢产物及其生物活性.方法 采用16S rRNA基因同源进化分析对菌株CWJ-256进行初步分类鉴定,采用抗菌活性追踪方式,对CWJ-256发酵液通过硅胶柱层析、凝胶柱层析、薄层色谱显色以及高效液相色谱等方法对目标化合物分离纯化,利用核磁共振波谱法和质谱法鉴定化合物的结构.采用MTT法测试其抗肿瘤细胞增殖活性.基于Gluc报告系统对化合物3的体外抗流感病毒药效学进行初步评价.结果 菌种鉴定显示Streptomyces sp.CWJ-256为生黑孢链霉菌Streptomyces melanosporofaciens;从该菌株的发酵代谢产物中分离得到3个活性化合物,经结构鉴定为efomycin G(化合物1)、11,11'-O,O-dimethylelaiophylin(化合物2)、elaiophylin(化合物3);抗肿瘤细胞增殖活性评价显示,化合物1和3对体外培养的人乳腺癌细胞MDA-MB-231具有增殖抑制作用(IC50分别为4.385和2.118μmol/L).体外抗流感病毒药效学评价显示,化合物3对流感病毒A/WSN/33(H1N1)具有一定抑制效果.结论 刺五加内生放线菌Streptomyces sp.CWJ-256可产生多个洋橄榄叶素类次生代谢产物,显示出抗细胞增殖、抗病毒等多种活性.
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海洋链霉菌7-145中洋橄榄叶素衍生物的分离鉴定
目的 分离鉴定海洋链霉菌Streptomyces sp.7-145产生的抗耐药菌活性成分.方法 通过活性追踪,利用大孔吸附树脂、凝胶、正反相色谱等多种色谱技术分离纯化活性成分;通过紫外光谱、质谱、核磁共振谱等波谱学方法鉴定其结构.利用琼脂稀释法和微量肉汤稀释法分别测定所得化合物的抗耐药菌和抗结核活性,利用MTT法评价其细胞毒性.结果 从中分离鉴定了4个活性化合物,其结构分别确定为洋橄榄叶素(1)、11-O-甲基洋橄榄叶素(2)、11,11'-O-二甲基洋橄榄叶素(3)、14'-去乙基-14'-甲基洋橄榄叶素(4).化合物1～4对甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)和万古霉素耐药的肠球菌(VRE)等革兰阳性耐药菌具有较强的抗菌活性,低抑菌浓度(MIC)为1～16μg/mL;所有化合物对结核分枝杆菌H37Rv株显示出显著的抑制活性(MIC:0.5～4μg/mL),其中化合物1对结核分枝杆菌多重耐药(MDR)、广泛耐药(XDR)等耐药株也表现出较强的抑制活性(MIC:0.5～1μg/mL);1和2对人肝细胞(L02)、肾上皮细胞(293T)和乳腺癌细胞(MCF-7)具有较强的细胞毒活性,IC50值为0.14～0.28 μmol/L.结论 化合物1～4具有较强的体外抗MRSA、VRE等耐药菌活性.首次发现洋橄榄叶素(1)具有体外抗结核分枝杆菌标准株、多重耐药以及广泛耐药株活性.化合物1和2对人正常肝、肾上皮细胞具有细胞毒性.
