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MexAB-OprM外排泵文献资料
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siRNA干扰铜绿假单胞菌MexAB-OprM外排泵MexB基因表达的体内效应研究
目的 探讨RNA分子干扰铜绿假单胞菌MexAB-OprM外排泵MexB基因的体内效应.方法 针对MexAB-OprM外排泵MexB基因设计siRNA小分子,构建干扰RNA(shRNA)表达载体,将带有小分子干扰RNA (siRNA)质粒电转入铜绿假单胞菌,从小鼠支气管内直接予以siRNA质粒干扰PAO琼脂菌体悬液(1×107 CFU/ml)攻击,建立PAO1野生型及siRNA2干扰型和siRNA阴性对照分子干扰型菌株的肺部感染动物模型.于感染后第1、2、3天腹腔注射美罗培南(100 mg/kg,2次/d).感染后第3、5、7天评估各组小鼠肺部细菌学、肺部病理学、细胞因子水平及肺组织中性粒细胞募集(MPO)水平变化.结果 siRNA2干扰组小鼠,感染后3、5、7d的肺部细菌负荷明显下降.且与siRNAnon组和Scrambled siRNA组比较,siRNA2干扰组小鼠感染早期(3 d)病理学改变明显减轻；MPO及炎性细胞因子(IL-1β和IL-12)表达水平升高.而在感染后期(7 d)siRNA2干扰组小鼠炎性细胞因子表达水平则下降.结论 siRNA分子干扰明显增加小鼠对铜绿假单胞菌感染的抵抗力,降低肺部细菌的载量,增加早期中性粒细胞募集到感染部位并诱导铜绿假单胞菌的早期免疫应答.siRNA分子联合抗生素的治疗,为慢性铜绿假单胞菌肺部感染的治疗提供了有意义的资料.
关键词： siRNA 铜绿假单胞菌 mexB基因 MexAB-OprM外排泵
