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霍乱弧菌溶原性噬菌体CTXΦ的氯霉素抗性基因标记及诱导
目的对携带霍乱毒素基因的溶原性噬菌体CTXΦ进行遗传标记,以深入研究CTXΦ对霍乱弧菌的转染机制.方法将CTXΦ基因组中ctxAB的上下游同源序列连接到cat基因的两侧,然后通过自杀质粒介导的DNA同源重组技术将霍乱菌株N16961染色体上CTXΦ基因组中的ctxAB基因缺失掉,替换以氯霉素抗性基因,对CTXΦ基因组进行遗传标记,然后用丝裂霉素C诱导这种经抗性基因标记的噬菌体,再利用它对古典型霍乱弧菌的转染检测活性.结果获得了ctxAB缺失、带有cat遗传标记的重组菌株N-Φc;诱导出的CTXΦc噬菌体颗粒成功感染了霍乱菌株1119.结论N-Φc中的CTXΦ带有了氯霉素抗性标记,诱导出具有感染活性的CTXΦc可用于研究毒力基因的水平转移.
