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伞枝犁头霉分泌的糖蛋白与人血管内皮细胞凋亡相关
目的 部分纯化伞枝犁头霉分泌的毒力因子,并研究其诱导人血管内皮细胞凋亡的机制.方法 用Con A Lectin亲和层析法纯化伞枝犁头霉分泌的糖蛋白,并在流式细胞仪下检测不同蛋白成分对人血管内皮细胞凋亡的影响.用变性和非变性法去除伞枝犁头霉糖蛋白的糖基,并分别检测其蛋白和寡糖成分诱导凋亡的活性.Western blot法分析伞枝犁头霉糖蛋白诱导人血管内皮细胞caspase激酶活化情况.用caspase抑制剂检测caspase-8和-9在凋亡反应中的作用.XTT法检测caspase抑制剂能否终止细胞存活率的抑制.结果 流式细胞仪分析显示伞枝犁头霉分泌的总蛋白和糖蛋白能以剂量依赖的方式诱导人血管内皮细胞凋亡,而非糖蛋白则无此活性.纯化的去糖基化蛋白和寡糖成分都不能独立诱导人血管内皮细胞凋亡.在凋亡信号传导途径中,caspase-9、-3和细胞色素C显著活化,而caspase-8未见活化.Caspase-9抑制剂能够终止伞枝犁头霉糖蛋白诱导的凋亡反应,而caspase-8抑制剂则无此效应.Caspase-9和-3抑制剂终止了人血管内皮细胞活性下降.结论 伞枝犁头霉分泌的糖蛋白具有诱导人血管内皮细胞凋亡的活性.糖蛋白结构的完整性对其诱导凋亡的活性是必需的.内源性凋亡信号传导途径介导了伞枝犁头霉糖蛋白诱导的凋亡反应.
关键词： 毛霉目 伞枝犁头霉 糖蛋白 人脐静脉血管内皮细胞 凋亡 -
白血病患者伞枝犁头霉感染二例
接合菌(毛霉)导致的人类感染称为接合菌病(毛霉病).接合菌是条件致病性真菌,接合菌病常发生于免疫受损患者,也可见于免疫基本正常的宿主.接合菌感染常见的危险因素包括糖尿病酮症酸中毒、烧伤、器官移植、白血病化疗、长期糖皮质激素治疗、去铁胺治疗、HIV感染以及外伤等~([1]).常见致病性接合菌包括根霉属、毛霉属和根毛霉属.
