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RNA-蛋白质结合试验文献资料
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PIP融合蛋白在大肠杆菌中的表达纯化及其与PRE特异性的结合
目的表达纯化PIP融合蛋白，探讨研究PIP与PRE特异性结合的方法。方法构建GST-PIP融合蛋白表达质粒pGENKS-PIP，表达质粒在大肠杆菌BL21中诱导表达GST-PIP融合蛋白，并用亲和层析柱加以纯化。利用这一融合蛋白通过Northwestern blot、UV-cross linking方法研究PIP与PRE的特异性结合。结果 GST-PIP融合蛋白表达质粒pGENKS-PIP在大肠杆菌BL21中成功地诱导表达了可溶性GST-PIP融合蛋白，纯化后获得了单一的GST-PIP融合蛋白。Northwestern blot和UV-cross linking证实PIP与PRE特异性结合。比较两种方法，前者较后者特异性高，灵敏度低,而后者操作简便。结论表达和获得纯化的PIP融合蛋白，PIP与PRE特异性结合。
关键词： PIP 纯化 RNA-蛋白质结合试验 紫外交联试验
