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  • 脑膜炎奈瑟菌A群荚膜多糖与B群外膜蛋白复合物偶联物的制备和免疫原性

    作者:孙银燕;胡绪敬

    目的 脑膜炎奈瑟菌(Nm)A群荚膜多糖与B群菌株3407或542852外膜蛋白复合物偶联,希望获得1种对A和B群Nm感染皆有预防效果,并可提高A群荚膜多糖对婴幼儿免疫力的偶联物.方法 用饱和硫酸铵沉淀细菌培养上清液,沉淀物再经Sephacryl S-300纯化获得外膜蛋白复合物.通过碳化二亚铵(EDC)介导的缩合反应将B群外膜蛋白复合物与A群荚膜多糖偶联.偶联物、未偶联的荚膜多糖、B群外膜蛋白复合物及A群荚膜多糖和B群外膜蛋白复合物简单混合物按相同程序免疫小鼠获得抗体,经ELISA、杀菌力试验和Western blotting测定了偶联物的免疫原性.结果 偶联物比未偶联的荚膜多糖或者荚膜多糖同B群外膜蛋白复合物简单混合抗原的免疫原性增强21~320倍;其中以B群3407菌株的外膜蛋白复合物与A群荚膜多糖偶联的效果更好.偶联物免疫血清不仅对A群代表菌株(29019)和B群菌株(3407,542852和29021)均有较强的杀菌活性,而且还对所试的具有不同菌型特征的其它8株B群菌株仍有较强的交叉反应性.Western blotting初步分析发现上述两种偶联物免疫的血清与各自的外膜蛋白复合物在相对分子质量约42×103、39×103和26×103处有相同的反应带,其中42×103左右的条带为1类外膜蛋白.结论 A群荚膜多糖与外膜蛋白复合物偶联后的偶联物对小鼠不仅具有很强的A和B群Nm的免疫原性,而且使ACPS的免疫原性也明显地增强了.

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