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人乳头状瘤假病毒中和抗体滴度和ELISA法测定的小鼠血清抗体滴度的相关性研究
目的 探讨两种不同的报告基因纽扣珊瑚绿色荧光蛋白(Zoanthus sp.green fluorescent protein,ZsGreen)和分泌性碱性磷酸酶(secreted alkaline phosphatase,SEAP)测量的人乳头状瘤假病毒中和滴度之间的相关性,以及中和滴度和抗体滴度的相关性.方法 将密码子优化的人乳头状瘤病毒(HPV)衣壳蛋白L1、L2基因表达质粒和报告基因质粒共转染293FT细胞,48 h后收集细胞裂解上清,柱层析纯化假病毒,对假病毒滴度进行测定.采集免疫过候选HPV疫苗和Gardasil疫苗的小鼠血清,测量血清的中和滴度和抗体滴度.结果 经统计分析,这两种报告基因系统的假病毒检测的中和滴度结果高度相关(Spearman相关系数r=0.760),而且中和滴度和抗体滴度的相关度很高(Spearman相关系数r=0.577和0.741).结论 两种不同的报告基因ZsGreen和SEAP测量的HPV假病毒中和滴度之间,以及中和滴度和ELISA测定的抗体滴度之间高度相关,揭示了部分HPV疫苗预防病毒入侵的机制,为快速准确鉴定HPV-16和HPV-18候选疫苗的免疫保护效果奠定了基础.
关键词: 假病毒 纽扣珊瑚绿色荧光蛋白 分泌性碱性磷酸酶 中和抗体滴度 -
伪狂犬病病毒上海株gE-/gI-/GFP+缺失株的生物学特性初步研究
在构建了伪狂犬病病毒上海株的缺失载体pgEI-GFP基础上,将pgEI-GFP转染感染了PRV-SH株的BHK-21细胞,待出现80%以上的细胞病变时收获病毒,并以绿色荧光蛋白为标志,通过蚀斑法得到纯化重组病毒gE-/gI-/GFP+缺失株.研究了该缺失株的的安全性、在细胞上的生长特性以及对断奶仔猪的安全性、免疫原性等生物学特性.试验结果显示,缺失了gE-和gI-后,不影响其在RK细胞上的生长状况和病毒的滴度.该疫苗株对小鼠的半数致死量比亲本毒低且对家兔的致死性的时间延长了,这表明该疫苗的毒力比亲本毒有所下降.该缺失株对断奶仔猪安全,无不良接种反应,接种断奶仔猪能抵御高剂量PRV-SH株强毒的感染,攻毒后试验猪的发热期、散毒天数均低于对照组.该缺失株接种仔猪后在试验期间一直维持较高水平的中和抗体.
关键词: gE-/gI-/GFP+缺失株 生物学特性 中和抗体滴度 -
双价肾综合征出血热灭活疫苗免疫原性检测
目的 检测生产的双价肾综合征出血热灭活疫苗的免疫原性. 方法 将生产的各批次双价肾综合征出血热灭活疫苗免疫家兔,并在初次免疫后1wk加免一次,每次免疫接种1ml/只.免疫前和免疫后第28d分别于家兔心脏采血,分离血清运用空斑减少中和实验测定血清的中和抗体滴度. 结果 所检测的5批双价肾综合征出血热灭活疫苗免疫家兔后其血清的中和抗体滴度均≥1:10,部分批次/家兔的免疫血清其中和抗体滴度≥1:20. 结论 所检测的5批双价肾综合征出血热灭活疫苗其免疫原性检测结果均达到中国国家药典要求.
关键词: 免疫原性 双价肾综合征出血热灭活疫苗 中和抗体滴度 空斑减少中和实验 -
测定双份血清标本的中和抗体滴度在诊断手足口病中的作用
目的 探讨双份血清标本的中和抗体滴度在手足口病(HFMD)患儿中的诊断价值.方法 参考手足口病预防控制指南(2009版)中血清学诊断方法,对986例患者进行双份血清标本的中和抗体滴度进行检测.结果 986患者以1~2岁年龄居多,不同临床类型HFMD患者血清学标本的双份抗体滴度检测结果具有统计学意义差异(P<0.01).结论 检测患者急性期血清和恢复期血清中和抗体滴度,方法精确,成本低廉,且具有特异性,值得在临床上推广.