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肝移植自发免疫耐受大鼠CD8+CD28-T抑制细胞的生物学特性
目的研究近交系大鼠原位肝移植自发免疫耐受模型中CD8+CD28- T抑制细胞的生物学特点.方法建立大鼠原位肝移植模型,流式细胞技术检测自发免疫耐受模型中CD8+CD28- T抑制细胞含量变化;通过体外混合淋巴细胞反应和体内输注验证CD8+CD28- T细胞的抑制功能,并检测其增殖、细胞因子mRNA的表达和诱导靶细胞发生凋亡的情况,并与急性排异组相比较.结果自发免疫耐受模型大鼠脾脏CD8+CD28- T细胞含量(31.5%±2.6%)显著高于正常大鼠(5.4%±1.5%)和急性排异组大鼠(6.0%±1.3%).自发免疫耐受组CD8+CD28- T细胞明显抑制体外混合淋巴细胞反应的增殖,体内输注显著延长皮肤移植物的存活时间(MST: 10±0.8 d vs 15±1.8 d,P<0.05),但急性排异组大鼠脾脏CD8+CD28- T细胞无抑制功能.外源性IL-2 40U/ml可逆转CD8+CD28- T细胞的抑制功能.CD8+CD28- T细胞不会增加靶细胞凋亡的发生,其IFN-γ mRNA为高表达,而急性排异组无表达.PHA 50μg/ml和IL-2 40U/ml、PMA/ion 50/250ng/ml和IL-2 40U/ml联合应用可有效刺激CD8+CD28- T细胞增殖.结论自发耐受组大鼠脾脏CD8+CD28- T细胞是一种T抑制细胞,在自发免疫耐受的形成过程中具有重要作用,其抑制作用可能与IFN-γ的免疫调节以及诱导同种异体反应性T细胞无能有关.
关键词： 原位肝移植 免疫耐受 CD8+CD28- T细胞 T抑制细胞 -
近交系大鼠肝移植自发免疫耐受模型的建立及其CD8+CD28-T细胞的作用
目的建立近交系大鼠原位肝移植自发免疫耐受模型,并研究CD8+CD28- T细胞在自发免疫耐受形成中的作用.方法双袖套法建立原位肝移植模型;流式细胞技术检测CD8+CD28- T抑制细胞含量变化;利用补体细胞毒和免疫磁珠方法分离CD8+CD28- T细胞,通过体外混合淋巴细胞反应验证其抑制功能.结果我们成功建立了BN(供体)LEW(受体)原位肝移植自发免疫耐受模型,并发现自发免疫耐受模型大鼠脾脏CD8+CD28- T细胞含量(23.7%±7.2%)显著高于正常大鼠(5.4%±1.5%)和急性排斥组大鼠(6.0%±1.3%),而且,分离纯化后的自发免疫耐受组大鼠脾脏CD8+CD28- T细胞可以抑制混合淋巴细胞反应的增殖,但急性排斥组大鼠脾脏CD8+CD28- T细胞无抑制功能.结论 BN(供体)LEW(受体)原位肝移植模型为自发免疫耐受;脾脏CD8+CD28- T细胞作为一种T抑制细胞,在自发免疫耐受的形成过程中具有重要作用.
关键词： 肝移植 免疫耐受 CD8+CD28- T细胞 T抑制细胞 -
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二硝基氟苯实验性结肠炎模型的建立及T抑制细胞亚群的研究
目的探讨CD8+T细胞亚群尤其是CD8+CD28 T抑制细胞在2,4-二硝基氟苯(DNFB)大鼠实验性结肠炎模型中的变化及其可能作用.方法建立DNFB实验性结肠炎大鼠模型,流式细胞仪计数检测脾脏和结肠黏膜上皮细胞内CD8+T细胞、CD8+CD28+T细胞和CD8+CD28 T抑制细胞的变化.结果成功地建立了DNFB大鼠实验性结肠炎模型.模型(n=12)中脾脏和结肠黏膜上皮细胞内CD8+T细胞含量与对照组(n=8)差异无显著性[脾脏:(34.6±7.2)%比(33.5±9.4)%,结肠:(14.0±8.9)%比(18.0±4.1)%,P＞0.05],CD8+CD28-T抑制细胞含量均显著高于对照组[脾脏:(11.3±2.3)%比(5.6±1.0)%,结肠:(6.5±5.4)%比(1.1±0.6)%,P＜0.05],而结肠黏膜上皮细胞内CD8+CD28+T细胞含量显著低于对照组[(7 5±4.2)%比(16.9±4.1)%,P＜0.05],脾脏CD8+CD28+T细胞含量亦低于对照组[(23.3±6.1)%比(27.8±9.7)%,P＞0.05].实验性结肠炎模型中脾脏和结肠黏膜上皮细胞内CD8+CD28 T抑制细胞占CD8+T细胞的比例均显著高于对照组[脾脏:(33.3±5 5)%比(18.4±7.3)%,结肠:(46.0±14.3)%比(6.1±3.7)%,P＜0.05].结论DNFB可诱导大鼠实验性结肠炎模型,模型中CD8+CD28 T抑制细胞含量增加可能是导致淋巴细胞增殖功能低下的原因之一.
