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染色与标记方法文献资料
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两种染色方法在细胞核DNA含量检测中的应用及比较
目的 探讨改良、快速两种Feulgen染色方法达到佳染色效果的水解时间段,为科研和临床的应用提供方法学指导.方法 选取5只成年健康雄性SD大鼠的肝组织,制成肝细胞涂片,分别在室温和60℃温度下水解不同时间,应用改良和快速两种方法染色,TIGER图像分析仪检测和分析单个肝细胞核的DNA含量.结果 (1) 不同大鼠肝细胞涂片在同一水解温度、时间作用下,相同DNA倍体含量肝细胞的DNA含量大致相同,CV值均小于10%;(2) 二、四、八倍体肝细胞核的DNA含量比值均接近2或4;(3) 同一大鼠相同水解温度不同水解时间,同一倍体的肝细胞核DNA含量存在差异:60℃水解温度下,IOD(5～7 min)＞IOD(9～15 min)＞IOD(1 min,20 min),室温水解温度下,IOD(50 min)＞IOD(20～30 min,70～90 min)＞IOD(5～1 min,100 min).结论 HCL水解肝细胞涂片时间过长或过短均不能理想的染色,快速法和改良法Feulgen染色达较佳染色效果的时间段分别为:快速法5～7 min,改良法20～90 min.
