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肝纤维化组织文献资料
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乙型肝炎肝纤维化组织双向电泳技术的优化
目的:建立并优化乙型肝炎肝纤维化组织蛋白质组研究所需的双向凝胶电泳技术,提高其分辨率和重复性.方法:外科手术获取乙型肝炎肝纤维化组织,提取肝组织总蛋白.利用固相pH梯度双向凝胶电泳技术分离总蛋白,考马斯亮蓝染色后分析凝胶图像.对2-DE中的关键因素与环节,如样本处理、上样量、电泳参数等各步条件进行了一系列优化.结果:优化条件后的乙型肝炎肝纤维化组织双向凝胶电泳图谱水平拖尾减少、斑点分辨率改善、斑点检出数量增加(246±33→729±83).结论:该双向凝胶电泳技术可应用于乙型肝炎肝纤维化组织的蛋白质组学研究.
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尿样在SELDI技术中的优化研究
目的:建立表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF/MS)技术检测尿液样本的方法.方法:采用SELDI技术及弱阳离子交换表面蛋白芯片(CM10)对糖尿病病例组和正常对照组的尿液样本进行分析,从尿液标本的采集、样品保存、上样浓度的控制、实验仪器的内外校准、实验结果重复性验证与分析等方面进行实验条件的优化.结果:反复冻融3次以上的样品经SELDI检测的出峰数量和峰强度情况较差；以1∶1或1∶2的浓度作倍比稀释后的样本经芯片检测得到的蛋白峰强度和蛋白数量优；对两组样本重复检测3次,蛋白丰度的平均变异系数(CV值)分别为0.121和0.095；两组样本共检测到202个蛋白峰,其中差异表达蛋白29个,在肝纤维化组中表达上调13个,表达下调16个.结论:初步建立了SELDI技术检测尿液样本的方法,提高了SELDI技术检测尿液样本的质量.
关键词： SELDI-TOF-MS CM10蛋白芯片 肝纤维化组织
