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雷公藤甲素对人结肠癌HCT116细胞Bcl-2/Bax和活性Caspase3表达的影响
目的 研究雷公藤甲素(triptolide,TP)对人结肠癌HCT116细胞中B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(B cell lymphoma/leukmia-2 associated X protein,Bax)/B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcell lymphoma/leukmia-2,Bcl-2)和活性Caspase 3表达的影响,从而研究TP对结肠癌细胞增殖的抑制作用及其可能的机制.方法 用不同浓度的TP(5、10、20、30、40、80 nmol/L)和空白对照组(0 nmol/L)处理HCT116细胞24、48、72 h,用MTT法检测TP对结肠癌细胞增殖的抑制作用.流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测蛋白Bcl-2、Bax和Caspase 3、cleaved Caspase 3蛋白表达水平的变化.结果 TP可显著抑制HCT116细胞的增殖,且细胞的存活率随着TP浓度和作用时间的增加而下降,呈浓度和时间效应.5、10、20、30、40 nmol/L浓度的TP分别作用HCT116细胞48 h,细胞凋亡率分别为4.25%、13.6%、34.4%、43.8%、44.5%,呈剂量依赖关系(P<0.01).10、20、30、40 nmol/L TP处理Tl16细胞48h,随TP浓度的增加,Bcl-2的蛋白水平不断降低,Bax在细胞质的蛋白水平下降,而在线粒体的蛋白水平升高,呈剂量依赖关系;Caspase 3的蛋白水平不断降低,促进cleaved Caspase 3的蛋白水平升高,呈剂量依赖关系.结论 TP可显著抑制HCT116细胞的增殖,可能通过抑制Bcl-2表达水平,促进cleaved Caspase 3表达水平,使其诱导人结肠癌HCT116细胞凋亡抵抗能力减弱.