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rhTRAIL55-281文献资料
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重组蛋白rh TRAIL55-281与GST-rh TRAIL55-281有肝细胞毒性
目的:检测重组蛋白rhTRAIL 55-281与GST-rhTRAIL 55-281的对肝细胞的毒性,以确定其是否可以开发为抗肿瘤药物.方法:采用胰酶消化与机械分离结合的方法,获取原代成人肝细胞和胎肝细胞.用FactorXa切除重组蛋白GST-rhTRAIL55-281的GST标签获取rhTRAIL55-281蛋白,然后分别利用rhTRAIL55-281与GST-rhTRAIL55-281干预肝细胞株L-02、原代成人肝细胞、原代胎肝细胞及对照组正常人外周血单个核细胞(PBMC),后利用流式细胞仪检测细胞的凋亡率.结果:获得的原代成人肝细胞和胎肝细胞细胞活力达95%以上,无GST标签的rhTRAIL55-281蛋白纯度达到97%;rhTRAIL55-281与GST-rhTRAIL55-281使肝细胞株L-02及原代成人肝细胞、胎肝细胞大量凋亡.在10 mL/L的浓度下,48 h后凋亡率分别为79.1%,72.8%,42.2%与80.3%,74.7%,47.2%,而对照组正常人PBMC基本不凋亡.结论:重组蛋白rhTRAIL55-281与GST-rhTRAIL55-281有肝细胞毒性.
