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T7 RNA聚合酶催化的荧光扩增技术检测人CEA
目的:建立检测人癌胚抗原(CEA)的T7 RNA聚合酶催化的荧光扩增技术(fluorescent amplification catalyzed by T7 polymerase technique,FACTT).方法:以亲和素作为连接分子,连接生物素化的检测抗体和生物素化的DNA,加入T7RNA聚合酶进行转录扩增反应,对生成的RNA产物进行荧光检测,并同时进行夹心酶联接免疫吸附剂测定(ELISA)方法检测人CEA.结果:成功的建立了检测人CEA的T7 RNA聚合酶催化的荧光扩增技术,其检测CEA的灵敏度达2×10-3 mg/L,比夹心ELISA方法灵敏度(0.25 mg/L)高125倍.结论:T7 RNA聚合酶催化的荧光扩增技术较夹心ELISA方法具有更高的敏感性,有可能作为一种新的检测方法用于临床的早期诊断.
关键词: T7 RNA聚合酶 荧光扩增技术 癌胚抗原 酶联接免疫吸附剂测定 -
膜联蛋白A2在肝癌患者外周血中的表达研究
目的:探讨膜联蛋白A2 (annexin A2,ANXA2)在肝细胞肝癌患者外周血中的表达及其与临床病理特征之间的联系.方法:把142例病人分为肝癌组和肝硬化组,其中肝癌组64例,肝硬化组78例,收集两组病人的血清,同时从血库收集40份正常人血清作为对照组,用ELISA法检测3组病人外周血中ANXA2的含量,并分析外周血中ANXA2的表达与肝癌的临床病理关系.结果:肝癌组患者血清中ANXA2的平均浓度为(36.21±13.50) ng/ml,肝硬化病人中ANXA2的平均浓度为(25.68±11.54) ng/ml,正常对照组ANXA2平均浓度为(21.09±6.86) ng/ml,肝癌组与肝硬化组、正常对照组比较,ANXA2平均浓度明显增高(P<0.01),同样,肝硬化组ANXA2平均浓度高于正常对照组(P<0.05).同时,AFP值较高、分化程度较低、肿瘤直径较大、发生复发转移以及感染HBV的肝癌病人,ANXA2在血清中的含量显著升高(P<0.05),而不同性别、年龄段的肝癌病人血清中ANXA2的表达水平相比无明显差异(P>0.05);但患者血清中ANXA2的浓度与AFP浓度之间无明显相关关系(r=0.077,P=0.546).结论:ANXA2的高表达可能与肝癌的发生发展密切相关,检测血清中ANXA2的含量有可能作为肝癌的诊断及预测复发转移趋势的一个指标,ANXA2有可能成为潜在的肝癌分子标志物及治疗靶点.
关键词: 肝癌 膜联蛋白A2 酶联接免疫吸附剂测定