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中性粒细胞多肽体外杀伤胃癌细胞活性观察
防御素(defensjns)是一组具有抗微生物活性和细胞毒活性的多肽,相对分子质量3000～4000,包括人中性粒细胞多肽(human neutrophil peptides,HNP).HNP占多形核中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophils,PMNs)总蛋白/肽量的5%,含量4～6pg/PMN[1],目前在国内外文献中有关防御素对胃癌细胞的毒性作用研究未见报道.本研究目的在于观察HNP对胃癌细胞系的毒性作用,并探讨其毒性作用机制
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人中性粒细胞多肽1,3真核表达载体的构建与鉴定
目的:扩增人中性粒细胞多肽1,3(HNP1,3)基因片段,构建真核表达载体pcDNA3.1/V5-His-TOPO/HNP1,3. 方法:从健康人中性粒细胞中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增出HNP1,3基因完整的cDNA片段,应用TA克隆插入pMD18-T载体,经酶切鉴定及序列分析确证后,将其亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His-TOPO中. 结果:从人中性粒细胞中克隆出人HNP1,3基因,经测序分析与GenBank公布的人HNP1,3核苷酸序列同源性为100%,成功地构建了真核表达载体pcDNA3.1/V5-His-TOPO/HNP1,3. 结论:真核表达载体pcDNA3.1/V5-His-TOPO/HNP1,3的成功构建,为后续重组基因的真核/表达及其对HIV-1抑制作用的研究奠定了实验基础.
关键词： 中性粒细胞多肽 反转录-聚合酶联反应 基因 克隆 -
人中性粒细胞多肽体外杀伤肿瘤细胞的实验研究
目的:观察人中性粒细胞多肽(human neutrophil peptides,HNP)对实体瘤胃癌细胞系和卵巢癌细胞系的毒性作用.方法:采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞杀伤活性.结果:HNP对胃癌细胞系和卵巢癌细胞系的毒性作用呈剂量和时间依赖性,在100mg/L,8h,杀伤率达87%,比较二者的毒性作用,其差异不显著.结论:HNP对这两种肿瘤细胞均具有显著的毒性作用,该毒性作用在这两种肿瘤细胞中无特异选择性.
