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胰腺小分子活性肽文献资料
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胰腺小分子活性肽对H2O2诱导体外大鼠胰岛细胞凋亡的影响
目的 研究胰腺小分子活性肽对H2O2诱导体外大鼠胰岛细胞凋亡的影响. 方法 采用胶原酶消化和组织培养法分离纯化大鼠胰岛细胞,检测其纯度与活性.对照组加入普通培养基,实验组培养基中加入不同质量浓度(100、200、300、400μg/ml)胰腺小分子活性肽,阳性对照组培养基中加入100nmol/L艾塞那肽.每组细胞做5个复孔(n=5),培养5d后每组均接受H2O2 100 μnmol/L处理1h.采用Hoechst33258核染色形态学观察；AnnexinV-FITC/PI双染色流式细胞仪检测各组细胞凋亡率；荧光定量PCR法检测bax、bcl-2及caspase3mRNA的表达；Western-bolt检测bax、bcl-2蛋白的表达. 结果 300、400 μg/ml胰腺小分子活性肽和阳性对照组胰岛细胞凋亡率小于对照组(P＜0.05);300、400μg/ml胰腺小分子活性肽组胰岛细胞bcl-2蛋白表达高于对照组(P＜0.05),bax与caspase3蛋白表达低于对照组(P＜0.05)；300、400 μg/ml胰腺小分子活性肽组胰岛细胞bcl-2 mRNA的表达高于对照组(P＜0.05),且bax mRNA的表达低于对照组(P＜0.05). 结论 胰腺小分子活性肽在浓度为300、400 μg/ml时对大鼠胰岛细胞凋亡有明显保护作用.
