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胰岛素样生长因子－1对甲状旁腺激素介导成骨细胞增殖及成骨活性的影响
目的：通过构建乳鼠颅盖骨成骨细胞分离培养与鉴定方法，研究胰岛素样生长因子－1（Insulin－like growth factor－1，IGF－1）及IGF－1联合重组人甲状旁腺激素1－34（recombinant human parathyroid hormone 1－34，rhPTH1－34）对成骨细胞增殖及I型胶原蛋白mRNA表达的影响。方法培养乳鼠成骨细胞，并观察其形态及功能，以原代培养乳鼠成骨细胞为实验模型，分空白组、PTH组、IGF－1组及不同浓度IGF－1作用的PTH介导的成骨细胞组（0、10、50、100 ng／L）。通过不同剂量的胰岛素样生长因子－1（0、10、50、100 ng／L）联合10－9 mol／L重组人甲状旁腺素刺激体外培养的成骨细胞，用噻唑蓝（ MTT）法检测细胞的增殖能力，RT－PCR法检测成骨细胞I型胶原蛋白mRNA的表达。结果 PTH和IGF－1均可促进成骨细胞增殖；IGF－1联合PTH可以促进成骨细胞增殖，且具有剂量依赖性。 PTH联合IGF－1使成骨细胞增殖能力增强、I型胶原蛋白mRNA表达增强。 IGF－1可以促进成骨细胞I型胶原蛋白mRNA的表达，且具有剂量依赖性。 IGF－1可以促进成骨细胞I型胶原蛋白mRNA的表达，且具有剂量依赖性。结论 PTH与IGF－1均可刺激成骨细胞增殖和分化，IGF－1可促进PTH对成骨细胞的分化、增殖。两者合用其作用增强，有协同促进作用。
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重组人甲状旁腺激素1-34多次皮下注射给药的人体药动学特征
目的 研究健康志愿者多次皮下注射重组人甲状旁腺激素1-34[(rhPTH(1-34)]后体内的药动学特征.方法 8名健康志愿者多次皮下注射rhPTH(1-34)后,采用放射免疫法测定血浆中rhPTH(1-34)浓度,评估它的药动学特性.结果 rhPTH(1-34)的主要药动学参数如下:d1, AUC0→t为(17103.3±2243.3)ng·min·L-1, AUC0→∞为(20471.3±2444.6)ng·min·L-1, ρmax为(171.2±34.2)ng·L-1, tmax为(38.1±15.1)min, t1/2为(55.7±3.9)min; d7, AUC0→t为(17759.6±3781.5)ng·min·L-1, AUC0→∞为(20698.4±3374.6)ng·min·L-1, ρmax为(184.6±36.8)ng·L-1, tmax为(35.0±16.0)min, t1/2为(51.6±7.6)min,蓄积系数R为1.02±0.18.结论多次皮下注射rhPTH(1-34)后,与单次给药相比它在人体内的吸收、消除不随连续给药变化,药物在体内没有蓄积作用.rhPTH(1-34)的安全耐受性良好.性别对药动学参数没有影响.
关键词： 重组人甲状旁腺激素1-34 药动学 放射免疫法 -
重组人甲状旁腺激素1-34的氨基酸组成分析
分析重组人甲状旁腺激素1-34的氨基酸组成,为该品种的结构鉴定提供依据.水解条件含1%苯酚的6mol/L盐酸,105℃水解24h;衍生方法异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生法;氨基酸测定色谱条件色谱柱为Phenomenex prodigyODS 100A(4.6mmx 25cm,5μm);流动相A为0.1mol/L醋酸钠(pH6.5)-乙腈(93:7),B为水-乙腈(1:4);二元梯度洗脱;检测波长为254nm;流速为lml/min;柱温为40℃.结果:实验值与理论值一致,偏差小于10%.本法准确、可靠、重现性好,可用于该产品的质量控制.
