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小发夹状干扰RNA文献资料
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靶向人白细胞介素17受体C的特异性shRNA表达载体的构建及鉴定
目的 构建同时靶向人白细胞介素17受体C(IL-17RC)的小发夹状干扰RNA (shRNA)真核表达载体.方法 设计并合成针对人IL-17RC cDNA的寡聚DNA引物,退火并连接至载体pGenesil-1,将重组质粒转染至293T细胞,提取转染或未转染293T细胞的mRNA,逆转录成cDNA,经荧光定量PCR检测细胞IL-17RC基因表达水平,后用流式细胞仪检测转染阳性细胞表面IL-17RC的表达.结果 1.限制性酶切和测序结果表明成功构建了人IL-17RC的特异性shRNA真核表达载体shRNA-IL-17RC.2.流式细胞仪显示pGenesi1-IL-17RC的转染效率大于40%,并能显著抑制细胞IL-17RC的表达.结论 shRNA-IL-17RC的构建为深入研究IL-17在骨关节炎(OA)中的功能以及针对细胞因子受体设计新的治疗OA的药物奠定基础.