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PEG-PLGA纳米粒子介导反基因寡核苷酸体外抗前列腺癌作用研究
目的 验证包载反雄激素受体基因三螺旋形成寡核苷酸(TFO)的聚乙二醇-聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PEG-PLGA)纳米粒子(TFO-NPs)对前列腺癌细胞的生长抑制作用.方法 采用改良自乳化溶剂挥发法制备TFO-NPs并进行体外物化表征.将TFO-NPs、脂质体包载的TFO(TFO-Lip)和裸TFO分别转染体外培养的LNCaP细胞,倒置荧光显微镜观察转染效率,MTT法检测细胞增殖活性,RT-PCR和Western blot方法检测AR基因表达.结果 TFO-NPs平均粒径128 nm,载药量为1.02%,包封率为72.28%,在体外具有缓释作用.LNCaP细胞对TFO-NPs和TFO-Lip的摄取率显著高于裸TFO.TFO-NPs和TFO-Lip对LNCaP细胞的抑制率分别为(54.5%±6.2%)和(50.6%±6.1%)显著高于裸TFO,(7.8%±0.8%)(均P<0.05).TFO-NPs和TFO-Lip处理组LNCaP细胞的雄激素受体表达水平显著低于裸TFO处理组.TFO-NPs和TFO-Lip处理组的转染效率、细胞抑制率和雄激素受体表达水平差异均无显著性.结论 成功制备了TFO-NPs,为反基因治疗前列腺癌的研究提供了有效基因载体.
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载雄激素受体三螺旋形成寡核苷酸PEG-PLGA纳米粒子的制备与应用
[目的]以生物可降解材料聚乙二醇-聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PEG-PLGA)制备载雄激素受体三螺旋形成寡核苷酸的纳米粒子(TFO-NPs),并初步探讨其对前列腺癌LNCaP细胞的生长抑制作用.[方法]采用改良自乳化溶剂挥发法(modified-SESD)制备TFO-NPs,对其形态、包封率、载药量及体外释放特点进行鉴定.倒置荧光显微镜观察LNCaP细胞对TFO-NPs的摄取情况,四唑盐(MTT)法测定体外细胞毒作用.[结果]制备的TFO-NPs呈球形、大小均匀,平均粒径128 nm,平均包封率和载药量分别为72.28%和1.02%,在体外具有缓释作用.LNCaP细胞对TFO-NPs的摄取率显著高于裸TFO.TFO-NPs对LNCaP细胞的抑制作用明显强于裸TFO(P<0.05),抑制率分别为61.2%±6.5%和20.7%±3.1%.[结论]本法制备的TFO-NPs理化性质优良,在体外能够有效抑制LNCaP细胞的增殖.