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同源基因定量聚合酶链反应条件的优化
目的 探讨同源基因定量聚合酶链反应(PCR)的佳反应条件.方法 用两种PCR仪分别扩增正常人位于唐氏综合征致病关键区域的人肝型磷酸果糖激酶基因(PFKL)和人肌型磷酸果糖激酶基因(PFKM).结果 两种PCR仪的佳退火温度分别是64℃和60℃,且只有在此反应条件下PFKL和PFKM的电泳条带光密度值具有一致性.结论 不同的PCR仪器检测唐氏综合征扩增条件也不同.
关键词: 唐氏综合征 同源基因定量聚合酶链反应 无创性产前基因诊断 -
应用SYBR Green I荧光染色同源基因定量聚合酶链反应快速诊断21-三体综合征
目的建立一个快速、准确诊断21-三体综合征(21-三体)方法.方法取26例21-三体患儿及20例正常人DNA标本,引用一对引物同时PCR扩增两个同源基因片断:21号染色体长臂的人肝型磷酸果糖激酶基因(PFKL-CH21)及1号染色体的人肌型磷酸果糖激酶基因(PFKM-CH1),用SYBR Green I荧光染色,琼脂糖凝胶电泳、凝胶成像系统分析软件测光密度进行定量分析.结果 24个PCR循环检测两个同源基因扩增产物光密度之比:病例组为1.61±0.18;正常人组为1.01±0.06,两组比值分布无重叠区,诊断结果与染色体核型分析一致,约4 h可完成.结论 SYBR Green I荧光同源基因定量PCR方法省时、简单、快捷、准确诊断21-三体,为临床及产前诊断21-三体提供一种新的诊断方法.
关键词: 21-三体综合征 诊断 荧光 SYBR Green I 同源基因定量聚合酶链反应