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miR-125b对结肠癌SW480细胞侵袭潜能影响及机制探讨
目的 结肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一,microRNA与其发生发展密切相关,且在结肠癌中的作用机制仍不清楚.本研究旨在探讨miR-125b对结肠癌SW480细胞侵袭的影响及机制,为阐明结肠癌发病机制提供理论依据.方法 将miR-125b导入结肠癌SW480细胞,观察miR-125b高表达对SW480细胞侵袭的影响.Targetscan 6.2及荧光素酶报告基因进行miR-125b对MCL1基因的靶向性分析;构建MCL1干扰载体,观察干扰MCL1表达对SW480细胞侵袭的影响.结果 miR-125b在SW480细胞中高表达后,细胞的侵袭率降低(miR-125b vs miR-ctr为85±12 vs 214±36;t=21.254,P=0.0054),细胞凋亡率增加,而Cleaved Caspase-3与Cleaved PARP蛋白质表达增加;miR-125b与MCL1基因启动子区域3′UTR的2613~2620位核苷酸位点结合;miR-125b在SW480细胞中高表达后MCL1蛋白表达降低;MCL1低表达后SW480细胞侵袭率降低(si-MCL1 vs si-ctr为108±16 vs 225±42;t=19.542,P=0.0068),细胞凋亡率增加,而Cleaved Caspase-3与Cleaved PARP蛋白质的表达增加.结论 miR-125b通过靶向抑制SW480细胞中MCL1基因表达,激活Caspase-3信号转导通路,使SW480细胞侵袭能力降低.
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MCL1在鼻咽癌中的表达水平及临床意义
目的 研究髓样细胞白血病蛋白1(myeloid cell leukemia-1 protein,MCL1)在鼻咽癌组织和鼻咽癌细胞中的表达情况,并分析其表达水平与鼻咽癌患者临床预后指标之间的关系.方法 运用免疫组化方法检测鼻咽癌组织和正常鼻腔黏膜组织中MCL1蛋白的表达差异,并分析MCL1表达与鼻咽癌患者临床病理指标之间的关系;运用Western blot法检测人鼻咽癌细胞系CNE2、CNE1以及人永生化鼻黏膜上皮细胞NP-69中MUC1蛋白表达情况.结果 免疫组化结果显示,鼻咽癌组织中MCL1表达阳性率为58.3％ (35/60),在正常鼻腔黏膜组织中MCL1阳性表达率23.8％ (5/21),鼻咽癌组织的MCL1表达水平显著高于正常鼻腔黏膜组织(P＜0.05);MCL1的表达水平与鼻咽癌患者的T分级、临床分期及淋巴结转移显著相关(P＜0.05),而与患者年龄、性别及分化程度无显著相关性(P＞0.05);同时,MCL1在鼻咽癌细胞系CNE2及CNE1中的表达高于NP69细胞,差异均有统计学意义(P＜0.05);结论 MCL1在鼻咽癌中可能起到促进肿瘤进展的作用,患者的MCL1表达水平可能与其预后相关.
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MCL1蛋白在胃癌中的表达及临床意义
目的:MCL1(myeloid cellleukemia-1)与多种恶性肿瘤的发生、发展及转移相关.本文从临床样本和细胞水平检测胃癌组织中MCL1蛋白的表达水平,探讨MCL1蛋白在胃癌发生、发展中的作用.方法:采用S-P免疫组化法检测正常胃黏膜、癌旁胃黏膜和胃癌组织芯片中MCL1蛋白的表达,Western blot检测MCL1蛋白在人胃癌BGC823、SGC7901、MKN28细胞中的表达.结果:免疫组化结果显示,MCL1蛋白表达定位于细胞的胞浆.着色呈黄色至棕黄色;正常胃黏膜、癌旁胃黏膜、胃癌中MCLI蛋白阳性表达率分别为18.18%(4,22)、54.17%(26,48)、83.33%(75/90):MCL1蛋白在胃癌中的表达高于癌旁胃黏膜及正常胃粘膜,癌旁胃黏膜与正常胃粘膜MCL1蛋白表达亦具有明显差异(P<0.05);MCL1蛋白阳性表达率在伴淋巴结转移组为93.48%(43/46).无淋巴结转移组为72.72%(32,44),两者差异有显著性意义(P<0.05);而与性别、年龄和肿瘤大小无关.S-P免疫组化法与Western blot结果显示MCL1蛋白表达与胃癌分化程度呈负相关.结论:MCL1蛋白表达与胃癌发生、分化程度和淋巴结转移相关.
