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反义寡核苷酸对骨肉瘤细胞MTA1基因表达及侵袭性影响的研究
目的:合成人肿瘤转移相关基因(MTAl)的反义脱氧寡核苷酸,观察其转染后对人骨肉瘤MG-63细胞系中MTA1表达及骨肉瘤侵袭性的影响.方法:免疫细胞染色观察人工合成正义、反义及无意义MTA1基因片段转染人骨肉瘤细胞MG-63后,人肿瘤转移相关基因的表达;RT-PCR和蛋白质印迹法检测MTA1基因mRNA和蛋白质表达水平的变化;Boyden小室体外侵袭实验检测转染前后细胞侵袭力的变化.结果:反义寡核苷酸处理骨肉瘤细胞后,MTA1 mRNA的表达下降(吸光度之比为25.09±0.21),与正义链组、无意义链组和空白对照组(35.19±0.17、33.20±0.23和37.17±0.18)相比差异有统计学意义,P<0.05.Boy-den小室体外侵袭实验检测显示,反义寡核苷酸处理后骨肉瘤细胞的透膜能力明显下降.结论:MTA1同骨肉瘤的转移能力密切相关,反义寡核苷酸的转染可阻遏骨肉瘤细胞中MTA1的表达,并因此有可能限制骨肉瘤的侵袭和转移.
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p16及Rb基因在骨肉瘤中的表达与相关性研究
目的:探讨p16、Rb基因在骨肉瘤中的表达及意义.方法:采用免疫组织化学方法(SP法),检测了2种基因在43例骨肉瘤和15例骨软骨瘤中的表达,并在2种肿瘤之间及骨肉瘤不同分化组之间进行比较.结果:抑癌基因p16在骨肉瘤中表达阳性率(69.8%)显著高于骨软骨瘤组的阳性率(20%),P<0.01;Rb基因在骨肉瘤中的表达阳性率(55.8%)显著低于骨软骨瘤组的阳性率(86.7%),P<0.05.在骨肉瘤中,p16与Rb基因表达之间存在显著负相关(r=-0.605,P<0.01).2种基因表达率在骨肉瘤不同分化组间差异无显著性(P>0.05).结论:在骨肉瘤中,不同程度地存在p16、Rb基因的表达异常,其在骨肉瘤发生发展中起着重要作用,是骨肉瘤分子水平研究的重要标志物.
