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STAT3在鼻咽癌中的表达特征及其与bcl-2和LMP1表达的关系
目的:探讨鼻咽癌中信号传导和转录激活子3(STAT3)的表达特征及其与bcl-2和EB病毒潜在膜蛋白1(LMP1)表达的关系.方法:采用原位杂交和免疫组化法分别检测62例鼻咽癌组织中EB病毒EBER1的表达和STAT3、bcl-2和LMP1蛋白的表达.结果:鼻咽癌中EBER1阳性率为100.0%(62/62);LMP1阳性率为61.3%(38/62);STAT3和bcl-2阳性癌细胞占癌细胞总数的百分率跨度分别为5.0%～95.0%和0～100.0%.STAT3与bcl-2表达呈正相关,rs=0.444,P=0.000.STAT3与LMP1表达无显著相关性.结论:鼻咽癌细胞中STAT3呈持续表达状态(即异常激活状态).STAT3的异常激活可能通过上调bcl-2这一抗凋亡基因的表达,从而延长了鼻咽癌细胞的生存时间.
关键词： 人类疱疹病毒4型 鼻咽癌 信号传导和转录激活子3 -
STAT3基因shRNA真核表达载体的构建与鉴定
目的 构建携带信号传导和转录激活子3(STAT3)基因短发夹状干扰RNA(shRNA)的真核表达载体.方法 从GenBank STAT3 mRNA上寻找到3条符合特征的靶序列,合成靶序列的DNA寡核苷酸链,合成双链DNA,并和BamH Ⅰ和HindⅢ酶切后的pRNAT-U6.1/Neo载体质粒连接产生重组质粒,PCR筛选阳性克隆,并行测序鉴定.重组质粒转染大肠癌LoVo细胞,RT-PCR检测STAT3的表达.结果 PCR和测序证实重组质粒构建正确.3种重组质粒对大肠癌LoVo细胞STAT3的表达有较强的抑制作用.结论 成功构建了携带有STAT3基因的短发夹状干扰RNA的重组质粒.
关键词： 核糖核酸干扰 信号传导和转录激活子3 -
肝再生磷酸酶-3-信号传导和转录激活子3-微小RNA21信号通路促进结肠癌细胞增殖侵袭的研究
目的 观察肝再生磷酸酶-3-信号传导和转录激活子3-微小RNA21(PRL-3-STAT3miR-21)信号通路对结肠癌细胞增殖侵袭的作用.方法 构建稳定转染PRL-3基因和空白对照质粒的结肠癌细胞株LoVo-PRL-3和LoVo-VC,用荧光实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测稳转细胞株中miR-21的表达并在瞬时转染PRL-3的SW480及CaCO2细胞中进行验证.用Western blot法对PRL-3调控STAT3的表达进行检测,在LoVo-PRL-3细胞中对STAT3进行RNA干扰,检测miR-21的表达,在稳转细胞株中转染miR-21或对其进行敲除,用细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell实验对细胞的增殖侵袭能力的变化进行研究.结果 LoVo-PRL-3细胞在72、96 h的增殖能力以及在Transwell实验24 h后的侵袭能力要强于对照组LoVo-VC细胞(P＜0.01).在结肠癌细胞株LoVo-PRL-3中pSTAT3、miR-21的表达明显上调,干扰STAT3可以抑制miR-21的表达(P＜0.05).在LoVo-VC细胞中过表达miR-21促进了细胞的增殖侵袭(P＜0.01),而在LoVo-PRL-3细胞中敲除miR-21抑制了细胞的增殖侵袭(P＜0.05).结论 PRL-3-STAT3-miR-21信号通路在结肠癌细胞增殖侵袭中起促进作用.
关键词： 肝再生磷酸酶-3 信号传导和转录激活子3 微小RNA21
