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隐睾症与生殖细胞肿瘤关联性的病理研究
目的:通过对隐睾患者检测神经细胞粘附分子(NCAM)及转录因子Oct-4蛋白,探讨隐睾症与生殖细胞肿瘤的关联性.方法:搜集入住我院的隐睾症的患者,采集隐睾睾丸标本,并进行睾丸活检,检测NCAM、Oct-4的表达;并分析两个指标的表达与隐睾位置和年龄的相关性.结果:NCAM在人隐睾中的表达与年龄组、睾丸位置无相关性(P＞0.05).但是大于5岁后隐睾内生精小管NCAM阳性表达有增高趋势.不同年龄组NCAM表达存在显著差异性(P＜0.05),小于1.6岁年龄组与大于5岁年龄组间存在显著差异性(P＜0.017),余年龄组间无显著差异性.NCAM在间质内阴性表达与睾丸位置分布无相关性(P＞0.05).Oct-4与NCAM生精小管内同时阳性表达有4例,其年龄及睾丸位置分布无规律.结论:NCAM、Oct-4在人隐睾中存在病理性表达,NCAM和Oct-4可作为临床预测隐睾患儿生殖潜能和睾丸癌变的筛查指标.
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两步法分离和培养人羊水来源胚胎间充质干细胞及其向神经元样细胞诱导分化的实验研究
目的 建立两步培养法分离培养人孕中期羊水间充质干细胞(MSCs)的方法,观察羊水MSCs向神经元样细胞的诱导分化.方法 采用改进的两步培养法分离和培养人羊水MSCs,以β-巯基乙醇诱导其向神经元样细胞方向分化;并使用流式细胞术、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫细胞化学法研究人羊水MSCs的生物学特性.结果 成功分离、培养和传代出人羊水MSCs.流式细胞术检测人羊水MSCs表达CD44、CD29、CD105,不表达CD45、CD34、人白细胞DR抗原(HLA-DR);免疫荧光法和RT-PCR检测表明,部分人羊水MSCs表达转录因子Oct-4.两步培养法羊水MSCs集落形成率[(15.0±2.3)%]和Oct-4阳性细胞率[(1.2±0.3)%]均高于一步法[分别为(10.0±1.8)%,(0.9±0.2)%,P均<0.05].羊水MSCs经β-巯基乙醇诱导后细胞形态发生改变,伸出突起并呈神经球样改变;免疫细胞化学法检测显示(54.76±3.65)%的细胞表达神经元特异性烯醇化酶(NSE),同时(36.28±4.27)%的细胞表达神经胶质酸性蛋白(GFAP).结论 人羊水中存在MSCs,两步培养法是一种高效、简便、实用而且不干扰常规产前诊断程序的方法.在体外条件下,利用β-巯基乙醇和适宜的培养液可使羊水MSCs定向分化为神经元.
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转录因子Oct-4和端粒酶在人胚胎生殖细胞的表达
目的 体外培养人胚胎生殖细胞(EGC),通过检测培养的细胞中转录因子Oct-4、端粒酶的表达,鉴定EGC.方法 取5～10周人胚胎的生殖腺嵴和肠背系膜,进行组织块体外培养,采用免疫细胞化学检测Oct-4、端粒酶表达.结果 组织块体外培养得到的细胞,经免疫细胞化学法显示的单个细胞或细胞集落,均阳性表达转录因子Oct-4、端粒酶.结论 组织块体外培养所获得细胞来源于原始生殖细胞(PGCs),为未分化的EGC.
